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培養基檢驗與驗收(二)非選擇性分離計數固體培養基的檢驗與驗收


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非選擇性分離計數固體培養基的檢驗與驗收非選擇性分離/計數固體培養基常用于細菌的計數、活化、分離純培養等用途,含瓊脂一般為1.2%-1.5%,培養基的組成為基礎營養成分,無抑制性,一般不具有針對性,適用于大多數細菌的培養。
培養基的出廠檢驗-生長率測定
1.菌液制備:將質控菌株接種至非選擇性肉湯或平板中進行活化培養(通?墒褂肨SB或TSA),使用生理鹽水或磷酸鹽緩沖液進行十倍系列稀釋至適宜梯度。
2.培養基準備:將待測培養基及參比培養基按標簽制備進行滅菌,制成平板備用(若采用傾注法接種,可將滅菌后的培養基置47-50℃水浴保溫備用)。細菌通常用TSA做參比培養基,真菌通常使用SDA,有特殊營養要求的菌可選用適宜的無抑制性培養基做為參比培養基。
3.接種及培養:吸取0.1mL制備好的菌懸液,分別涂布至待測培養基和參比培養基,每平板接種水平為20-200CFU,至少接種2塊平板,將接種好的培養基置于標準規定的條件下進行培養。
4.結果計算及判定:生長率PR=NS(待測平板菌落總數)/NO(參比培養基平板菌落總數,應≥100CFU),目標菌在待測培養基上應有典型的生長,生長率應不小于0.7。
培養基的驗收方法
將質控菌株接種至非選擇性肉湯培養基中過夜培養制成工作菌懸液,使用1μL接種環挑取1環菌液,按照標準的方法連續劃16線,置于標準規定的溫度培養,如果僅一半的線有稠密菌落生長,則G為0.5。如果劃線上沒有菌落生長、生長量少于劃線的一半或菌落生長微弱,則G為0,計算G值總和,應達到G≥6。

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