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肺炎支原體的靈敏度試驗方法


支原體肉湯培養基

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肺炎支原體靈敏度試驗肺炎支原體的靈敏度試驗采用支原體肉湯培養基進行培養,主要的步驟包括:實驗物品準備及滅菌,添加血清,調節培養基pH,接種肺炎支原體。本視頻詳細講解了實驗的具體過程以及如何有效避免污染的操作方法,希望對您有所幫助。
1.培養基的配制及物品的準備:將陶瓷缸、試管使用蒸餾水沖洗干凈備用,配制海博支原體肉湯培養基于陶瓷缸中溶解完全,分裝試管,每管8 mL,塞上膠塞。之后將培養基、碳酸鈉溶液、移液槍頭包好,于121℃滅菌鍋中滅菌15分鐘。
2.燒試管口:滅菌結束后,待培養基冷卻至室溫后,對每支試管灼燒管口,將管口水分烤干,可有效防止污染,膠塞也需過火。此后操作過程中,只要試管進行了震蕩操作,特別是震蕩過程中有液體接觸到試管口處的膠塞,均需再次燒口。
3.添加血清:向每支試管中添加2 mL的血清,震蕩均勻。
4.調節pH:取三支試管使用碳酸鈉調節pH至7.4~7.8,本次確定碳酸鈉平均添加量為0 μL。因此無需添加碳酸鈉即可進行下一步操作(注意:均使用滅菌后的碳酸鈉以避免誤差)。
5.接種肺炎支原體:接種肺炎支原體于培養基中混合均勻記為-1,并做梯度稀釋至-9,設兩支未接種的培養基為陰性對照管。使用封口膜封口,之后放置于36℃±1℃的培養箱中培養7-14天。
6.結果觀察:培養第9天,靈敏度為9。

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