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馬尿酸鈉水解實驗操作視頻


1%馬尿酸鈉生化管

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馬尿酸鈉水解實驗實驗原理:
馬尿酸鈉水解實驗通常用于空腸彎曲菌的鑒定,也可用于軍團菌、乳酸菌、B族鏈球菌的鑒定。
這些細菌具有馬尿酸鈉水解酶,可將馬尿酸鈉水解為甘氨酸和苯甲酸,甘氨酸可與茚三酮反應生成紫色化合物。

操作步驟:
1. 取出馬尿酸鈉生化管,置于安瓿瓶試管架中,做好標記,包括菌株名稱、菌株編號,在易折點處(即瓶頸上方藍點)掰開安瓿瓶,備用。
2. 用接種環挑取空腸彎曲菌的大量菌苔接種至生化管,混合均勻,相同方法接種結腸彎曲菌,并設置一支空白對照,放置于36℃水浴2h,也可放置于36℃培養箱培養4h。

3. 下面配制3.5%(水合)茚三酮溶液,用移液槍分別吸取5mL丙酮和丁醇,至棕色瓶中混合均勻,稱取0.35g(水合)茚三酮溶解于丙酮/丁醇混合溶液中,備用。

4. 培養結束后,取出生化管,用移液槍吸取0.2mL茚三酮溶液,沿著管壁緩慢加入管中,不可振蕩,再置于36℃水浴10min或培養箱中溫育10min,觀察試驗結果。

結果判斷:

溫育結束后,取出生化管,觀察試驗結果,接種空腸彎曲菌的生化管變為深紫色,為陽性結果;接種結腸彎曲菌的生化管為黃色,與空白對照一致,為陰性結果。

注意事項:

1. 此試驗需用新鮮的菌,接種時需挑取大量菌體(接種環一滿環),若接種量太少可能會出現假陰性;

2. 掰開安瓿瓶時最好包裹紗布,以免劃傷手指;

1%馬尿酸鈉生化鑒定管應放置與-20℃保存;

4. 茚三酮溶液最好現配現用,如需保存,可在避光冷藏條件下保存不超過7d。


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