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創傷弧菌的初步檢測


3%氯化鈉胰蛋白胨大豆瓊脂
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創傷弧菌的初步檢測 實驗操作:
1、樣品制備:按照標準進行取樣。
2、增菌:按標準方法進行增菌,培養后PNCC增菌液混濁。
3、分離:用10 μL接種環在距離PNCC增菌液的液面下1 cm沾取一環增菌液,分別劃線接種于CC和mCPC平板,于36℃±1℃條件下培養18 h±1 h。
典型的創傷弧菌可以發酵纖維二糖產酸使培養基變黃,所以在CC和mCPC平板上的形態為:圓形、扁平,中心不透明但邊緣透明的黃色菌落
4、分純培養
從CC平板和mCPC平板上各挑取至少5個創傷弧菌可疑菌落,分別接種于3%氯化鈉胰蛋白胨大豆瓊脂平板上,36℃±1℃培養18 h±1 h后用于后續鑒定。
創傷弧菌在3%氯化鈉胰蛋白胨大豆瓊脂平板上應為:直徑1 mm~2 mm,圓形、乳白色菌落。

結果觀察:
挑取分純后的同一個單菌落,進行以下4項鑒定實驗。
革蘭氏染色鏡檢 、氧化酶試驗 、三糖鐵試驗 、嗜鹽性試驗(革蘭氏染色和氧化酶實驗詳見往期視頻)
①革蘭氏染色鏡檢:革蘭氏陰性,棒狀、弧狀、卵圓狀等多種形態,無芽胞。
②氧化酶試驗:氧化酶試紙變藍,為陽性。
③三糖鐵試驗:挑取純化后的同一個單菌落,劃線接種于3%氯化鈉三糖鐵瓊脂斜面并穿刺底層,36℃±1℃培養24 h,觀察結果。試管底層變黃,無氣泡,斜面顏色不變黃。
④嗜鹽性試驗:挑取純化后的同一個單菌落分別接種于含有0%、3%、6%、8%、和10%氯化鈉的胰蛋白胨水中,36℃±1℃培養24 h,觀察液體的混濁情況。
創傷弧菌在含有0%、8%、和10%氯化鈉的胰蛋白胨水中不生長或微弱生長,胰蛋白胨水澄清透亮或稍混濁,而在3%和6%氯化鈉的胰蛋白胨水中生長旺盛,胰蛋白胨水混濁。


后續還需要進行確證鑒定進行進一步確認,敬請期待后續視頻!



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