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三糖鐵實驗操作視頻


三糖鐵瓊脂(TSI)
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三糖鐵實驗操作視頻 簡介:
三糖鐵試驗常用于沙門氏菌、志賀氏菌、副溶血性弧菌等致病菌的生化鑒定和初篩。相比較于克氏雙糖鐵,三糖鐵中增加了蔗糖,擴大了非目標菌的排除范圍,增加了初篩的能力。
注:做弧菌的生化鑒定時,通常使用含1%或3%氯化鈉的三糖鐵瓊脂。
第一步:培養基制備
若使用干粉培養基自行制備三糖鐵斜面需要注意配時一定要加熱煮沸并不停攪拌至瓊脂完全溶解,才能分裝試管。不然會因為瓊脂沒有完全溶解,造成有些試管不凝固,或凝固不完全的情況。
將分裝好的試管放入滅菌鍋滅菌。
滅菌結束后,將試管擺成高層斜面狀,斜面/底層 ≈ 2/3 
若使用一次性塑料試管,則需將培養基滅菌后再進行無菌分裝,擺高層斜面。(畫面:一次性塑料試管圖片)。
也可直接使用海博生物成品三糖鐵管進行實驗,免去繁瑣的配制過程。
第二步:接種待測菌
用接種挑取待測菌落,在斜面上“之”字形劃線,再于底層穿刺(穿刺底層深度2/3左右即可),
培養過程中必須確保試管透氣性良好,使用成品三糖鐵管時不可將蓋子蓋緊
之后將培養基置于36±1℃培養18-24h后,觀察結果。
現象觀察
斜面或底層
若為紅色,則為產堿,常用“K”表示;
若出現變黃,則為產酸,常用“A”表示;
底層若有變黑出現,則為硫化氫陽性;
若底層出現氣泡或瓊脂出現斷層,則為產氣陽性。
斜面紅、底層黃的K/A型:此類細菌僅能發酵葡萄糖產酸,不能發酵乳糖和蔗糖,如大多數的沙門氏菌、志賀氏菌、副溶血性弧菌等;
斜面和底層均為黃色的A/A型:此類細菌則至少能發酵乳糖和蔗糖其一,如大腸桿菌、普通變形桿菌、霍亂弧菌等;
斜面和底層均為紅色的K/K型:此類細菌通常不能發酵葡萄糖或僅能有氧分解葡萄糖,如銅綠假單胞菌、糞產堿桿菌等;
多數沙門氏菌、大腸桿菌、變形桿菌可以產氣,出現氣泡或斷層;
產硫化氫的沙門氏菌和變形桿菌等底部可以觀察到變黑現象。

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