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單增李斯特氏菌的生化鑒定


HBI單增李斯特氏菌生化鑒定條(GB)

點擊下載清晰視頻

單增李斯特氏菌的生化鑒定操作視頻 往期回顧:
在之前單增李斯特氏菌的初步檢測實驗視頻中,我們分離出了可疑菌落,(此處可貼圖放大展示)本期視頻就來繼續講解單增李斯特氏菌的生化鑒定,進一步來確定可疑菌落是否為單增李斯特氏菌。
革蘭氏鏡檢:
挑取純培養的可疑菌落進行革蘭氏鏡檢,單增李斯特氏菌為革蘭氏陽性短桿菌。
生化實驗:
取一盒海博生物HBI單增李斯特氏菌生化鑒定條,其中包含了單增李斯特氏菌的各項生化,除了5條生化鑒定條外,還包含一盒SIM生化管和一盒過氧化氫酶試劑。
(1)動力實驗
取一支sim生化管或半固體生化管,挑取純培養的單個可疑菌落,穿刺于生化管中,之后置于25℃~30℃培養48h。李斯特氏菌有動力,在半固體或SIM培養基上呈傘狀生長,如傘狀生長不明顯,可繼續培養5d,再觀察結果。
(2)過氧化氫酶實驗
用一次性接種針挑取單個可疑菌落,置于干凈的載玻片上(不可使用金屬接種環),在易折點處掰開過氧化氫酶試劑,用移液槍吸取適量試劑,滴加在菌落上,30s內產生大量氣泡,為過氧化氫酶陽性。單增李斯特氏菌為陽性反應。
(3)糖發酵試驗和MR-VP試驗
選擇過氧化氫酶為陽性的純培養的菌落,接種至無菌生理鹽水管中,充分振蕩混勻制成均一的菌懸液,
取一支生化鑒定條,打開蓋子,用酒精棉擦拭鑒定條表面及打孔器,依次打孔,用移液槍吸取待測菌菌懸液,每孔加入100ul,接種完畢后,蓋上蓋子,置于36℃±1℃培養。
培養結束后,在第7孔滴加甲基紅試劑,第8孔滴加VP試劑甲液3滴,乙液1滴放在記錄卡上觀察。進行單增李斯特氏菌結果描述。
注意:vp實驗需要在滴加試劑后,4h內觀察結果。變紅為陽性。
除了進行上述生化實驗外,單增李斯特氏菌還需進行溶血實驗,才能最終確定,敬請期待后續視頻!

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