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明膠液化實驗操作視頻


明膠生化管
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明膠液化實驗操作視頻 什么是明膠?
明膠為從骨膠原而來的一種蛋白質,可溶于熱水,形成的溶液凝固點在20-30℃,低溫時呈固態狀不流動,超過30℃時呈液體狀。某些細菌具有明膠酶,可將明膠水解為多肽、氨基酸后失去凝膠性質,低溫下不再凝固。
操作步驟:
可使用溫水、培養箱或用手捂熱等方法將明膠生化管溫熱至大約30-40℃,培養基呈液體流動狀,擺直立,打開生化管,可用接種針或接種環挑取待測菌落穿刺接種或加入50-100μL的約109CFU/mL的菌懸液,纏上封口膜,置于36℃或其他適宜的條件下進行培養。
結果觀察:
將生化管放入冰箱冷藏中10-20min或采用其他方法將培養基冷卻至10℃左右,傾斜生化管,觀察培養基是否能凝固。若培養基凝固不流動,說明明膠未被分解液化,為陰性反應;若培養基不能凝固呈液體狀,說明明膠已被水解,為陽性反應。
注意事項:
(1)明膠在培養箱中和室溫較高時呈液態狀,因此觀察試驗結果時,必須確保培養基已完全冷卻。
(2)細菌液化明膠的時間存在差異,有些細菌可在18-24h液化,有些細菌需要3-7天甚至更長時間才能液化,當出現陰性結果時,應至少觀察一周。
(3)明膠的凝固點在28℃左右,受運輸過程的溫度及震蕩影響,有可能出現培養基在管壁凝固形成不規則狀,此為正,F象,并非質量問題,使用前可用水浴或培養箱或其他方法溫育,使培養基呈液體流動狀,擺直立即可。

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