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血漿凝固酶實驗


凍干兔血漿

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血漿凝固酶實驗實驗步驟:
(1)首先取一盒海博生物凍干兔血漿,按瓶蓋上箭頭方向掀開并撕下鋁箔蓋
(2)用鑷子打開西林瓶膠塞。
(3)用移液槍吸取0.8ml新鮮的BHI肉湯培養物,加入西林瓶中。
“新鮮”即為,培養物從培養箱取出后,立即進行試驗。以保證培養物酶活力良好。避免出現因取出一段時間后,因酶活力降低而引起的假陰性。
也可以每支西林瓶中加入0.5ml滅菌生理鹽水輕微搖晃至完全溶解,然后加入0.3ml肉湯培養物。
(4)之后塞上膠塞,輕輕搖動瓶身至混合均勻,注意不要采取劇烈搖晃的方式,之后置36℃±1℃培養。
結果觀察:
每半小時觀察一次,觀察6h, 觀察時采用將西林瓶緩慢傾斜或倒置的方式,切記不要劇烈搖晃,如凝固為陽性,不凝固則為陰性。
實驗原理:
致病性葡萄球菌能產生游離凝固酶,釋放于血漿中,被血漿中的凝固酶致活因子激活后變成耐熱的凝固酶樣物質,此物質使纖維蛋白原變為固態纖維蛋白,血漿因而凝固。
特別提醒:
試驗必須每半小時觀察一次,不可直接觀察6h后的結果。一些金黃色葡萄球菌能夠產生蛋白酶來分解纖維蛋白,而出現先凝集而后消融的情況,所以需每半小時觀察一次,防止因觀察不及時,而誤判成假陰性。


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