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李斯特氏菌的初步檢測


李斯特氏菌顯色培養基

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李斯特氏菌檢測操作步驟:
1、取一環經過LB2二次增菌的樣品培養液劃線接種于PALCAM瓊脂平板,同時劃線接種于李斯特氏菌顯色平板,于36℃±1℃培養24h~48h,觀察各個平板上生長的菌落。
2、單增李斯特氏菌典型菌落在PALCAM瓊脂平板上為小的圓形灰綠色菌落,周圍有棕黑色水解圈,有些菌落會有黑色凹陷;
原理:這是因為李斯特氏菌屬都能夠水解七葉苷生成6,7-二羥基香豆素,該物質與培養基中的檸檬酸鐵銨中的鐵離子作用生產一種黑色物質,從而使培養基變黑色。
3、在海博李斯特氏菌顯色平板上為藍綠色菌落,周圍有一不透明環。
說明:李斯特菌屬在此培養基上都是藍綠色菌落,但只有單增李斯特氏菌和綿羊李斯特氏菌藍綠色菌落周圍有一層暈圈。單增李斯特氏菌與綿羊李斯特氏菌可以通過后續溶血環大小得到區分。因此,李斯特氏菌顯色培養基效果明顯優于PALCAM等傳統培養基。
4、從選擇性瓊脂平板上分別挑取3個~5個典型或可疑菌落,分別接種木糖、鼠李糖發酵管,于36℃±1℃培養24h±2h,同時在TSA-YE平板上劃線進行純培養,于36℃±1℃培養18h~24h。
培養后選取木糖陰性(呈藍色或藍綠色)、鼠李糖陽性(呈黃色)的TSA-YE平板純培養物繼續進行后續的鑒定。


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