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濾膜法檢測產氣莢膜梭菌


亞硫酸鹽-多粘菌素-磺胺嘧啶瓊脂基礎(SPS)

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硝酸鹽還原實驗操作步驟:
1、首先,將帶菌濾膜,用滅菌鑷子夾住其邊緣部分,帶菌的一面朝上,貼在培養基上。注意:濾膜往培養基上放置時,應先讓其一邊的外緣接觸培養基,再輕輕松開鑷子,讓濾膜沿著先貼緊的部位逐漸與培養基接觸,直至全部貼緊。這樣貼的濾膜,中間不會有氣泡產生。
2、將貼上濾膜的培養基平板,倒置放于厭氧培養裝置內,此處我們使用是的海博生物厭氧產氣包,厭氧培養袋和氧氣指示劑。打開厭氧培養袋整理底部,將平板放入培養袋中,放入厭氧產氣包,掰開氧氣指示劑,待兩分鐘后表層變藍,再將其置于厭氧培養袋中,將厭氧培養袋密封好。
3、36℃厭氧培養24h后,如果濾膜上長出黑色菌落,就初步懷疑是產氣莢膜梭菌,可以挑取這種菌落進行進一步鑒定。
原理解釋:
產氣莢膜梭菌之所以能形成黑色菌落,是因為SPS培養基中含有亞硫酸鈉和檸檬酸鐵銨,產氣莢膜梭菌可還原亞硫酸鹽為硫化物,硫化物再與鐵反應生成黑色硫化鐵,從而使菌落中心呈現黑色;
而其它雜菌不會長出,是因為培養基中添加了多粘菌素B和磺胺嘧啶鈉,能有效抑制除梭菌外的其它雜菌的生長。


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