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硝酸鹽還原實驗


硝酸鹽還原(生化管)

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硝酸鹽還原實驗所需試劑:
1、硝酸肉湯生化管:有GB033、SN047、GB182等多種配方,適用于不同細菌的硝酸鹽還原試驗,可根據具體需要選用。本視頻以GB033為例介紹。
2、GB129硝酸鹽(產氣):用于細菌的硝酸鹽還原產氣試驗。
3、HB8282硝酸鹽還原試劑盒:與硝酸鹽肉湯配套使用,用于結果觀察。
試驗菌的接種:
1、GB033:打開安瓿瓶,接種試驗菌,36±1℃培養18-24h。
2、GB129:使用前需將小倒管中氣體排出,打開管蓋,接種試驗菌,36±1℃培養20-24h,注意專性需氧菌培養時不能將管蓋擰緊。

結果判斷及原理:
1、GB033:接種試驗菌培養后的硝酸鹽肉湯需滴加硝酸鹽還原試劑來檢驗硝酸鹽是否被利用生成亞硝酸鹽。
①若試驗菌利用硝酸鹽生成亞硝酸鹽,亞硝酸鹽與試劑反應生成紅色物質,則滴加試劑后呈紅色(陽性);
②若試驗菌利用硝酸鹽生成氨,則滴加試劑為無色,此時繼續加入適量鋅粉,仍不變紅,證明培養物中無硝酸鹽的存在(全部被利用),硝酸鹽還原試驗依然判為陽性;
③若試驗菌不利用硝酸鹽,則滴加試劑為無色,繼續加入鋅粉后溶液變紅,證明硝酸鹽未被利用,結果判定為陰性。
2、GB129:若試驗菌利用硝酸鹽生成氮氣,則小倒管中囤積氣體,判定為陽性;小倒管中無氣體,則判定為陰性。

鋅粉的作用:
鋅粉可將硝酸鹽還原為亞硝酸鹽,亞硝酸鹽繼續與硝酸鹽還原試劑發生紅色反應因此可以用鋅粉來檢驗培養基中是否還含有硝酸鹽,從而幫助判斷反應的陰陽性。

注意事項:
某些細菌利用硝酸鹽緩慢可延長時間培養,結果為陽性依然可判定為硝酸鹽還原陽性。


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