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培養基的加熱滅菌操作(以XLD 、SC為例)


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培養基的加熱滅菌操作培養基在使用之前必須進行滅菌處理,通常來說使用最多的是壓力蒸汽滅菌法,但對于某些培養基(xld sc 等)來說,高壓條件會破壞培養基中的某些成分,因此只能采用加熱滅菌的方式進行處理。
一、固體培養基的加熱滅菌(以XLD培養基為例)
1.準確稱取200ml培養基的量11.4g,加入到裝有210ml去離子水(10ml為5%的水分損耗)的搪瓷缸中,用玻璃棒攪拌至無干粉完全溶解。
2.將搪瓷缸置于電磁爐上,一邊加熱,一邊攪拌,當液面完全沸騰后,立即將搪瓷缸從電磁爐上拿開,算是一次煮沸操作;液面回落后,立即放回電磁爐,重復上面的步驟,總共煮沸4-6次即可。

二、液體培養基的加熱滅菌(以SC培養基為例)
液體培養基的稱量溶解過程都和固體加熱滅菌的操作方法一樣,不同的是在微波爐上加熱至微微沸騰后需迅速置于冰水中降溫,待其完全冷卻后分裝至無菌試管備用。
這是因為SC液體培養基中含有亞硒酸氫鈉,過分加熱會使其分解,導致培養基選擇性下降,影響實驗結果判斷,因此只能輕微加熱。
正常加熱滅菌的SC培養基,為淡黃色澄清透亮的液態。過分加熱滅菌的SC培養基,為紅色液態,此時則不能使用。


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