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MR-VP實驗


MR-VP培養基

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MR-VP實驗 操作步驟:
1.挑取實驗菌苔接種于生理鹽水管中,制備菌懸液,本實驗以大腸埃希氏菌、單增李斯特氏菌、產氣腸桿菌為例,進行實驗;
2.然后用移液槍吸取100ul菌懸液,接種于磷酸鹽葡萄糖胨水培養基中,每種菌接種2個試管;
3.之后放置于36℃培養24-48h。

MR實驗:
向試管中滴加3滴甲基紅試劑,觀察顏色變化,接種大腸桿菌和單增李斯特氏菌的試管變紅,為陽性反應;接種產氣腸桿菌的試管不變紅,為陰性反應。
實驗原理:不同細菌分解葡萄糖的產物不同,大腸桿菌、單增李斯特氏菌可分解葡萄糖產生大量酸,使pH值下降到4.5以下,所以滴入甲基紅顯紅色; 產氣腸桿菌產酸較少,所以滴入甲基紅顯橙黃色。

VP實驗:
另取試管,向試管中滴加V-P試劑A液(6%α-萘酚-乙醇溶液)9滴,B液(40%氫氧化鉀溶液)3滴,建議最低使用量為A液6滴、B液2滴。充分振蕩混勻,之后置于36±1℃培養0.5-4h。
培養結束后觀察結果,發現接種大腸桿菌的試管不變紅,為陰性反應;接種單增李斯特氏菌和產氣腸桿菌的試管變紅,為陽性反應。
實驗原理:產氣腸桿菌、單增李特氏菌分解葡萄糖產生丙酮酸,并使丙酮酸脫羧,生成中性的乙酰甲基甲醇,在堿性溶液中被空氣氧化生成二乙酰,繼續與培養基中的胍基反應生成紅色化合物,即為V-P陽性。


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