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MUG培養基使用操作視頻


MUG培養基

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MUG培養基使用操作視頻操作步驟:
1.取細菌的新鮮培養物,用接種環接種于生理鹽水管中,振蕩混勻。
2.按照10倍系列稀釋法制備菌液,取接種量為10-100cfu的菌懸液,進行試驗。
3. 用移液槍吸取100μL稀釋好的菌液接種到MUG培養基管中,接種兩個平行管,同時吸取100μL生理鹽水接種到MUG培養基管中作為空白對照。
4. 相同的方法接種其他菌株,之后放置于30-35℃培養5-24小時。

結果觀察:
發現接種大腸埃希氏菌和陰溝腸桿菌的試管變渾濁。而接種金黃色葡萄球菌的試管為澄清狀態。

葡萄糖醛酸苷酶檢測:
在黑暗環境中,使用366nm紫外燈照射培養后的試管,發現接種兩株大腸埃希氏菌的試管均產生藍白色熒光,這是因為MUG的β-糖醛酸苷鍵被大腸埃希氏菌產生的葡萄糖醛酸苷酶水解,釋放出4-甲基傘形酮,4-甲基傘形酮在紫外燈下可產生藍白色熒光。
而接種陰溝腸桿菌和金黃色葡萄球菌的培養管無藍白色熒光,說明這兩株菌不能產生葡萄糖醛酸苷酶。

靛基質試驗:
向培養后的試管滴加Kovacs靛基質試劑2-3滴,立即觀察結果,也可以放置室溫5-10min觀察結果。發現接種兩株大腸埃希氏菌的試管均有紅色環產生,這是因為蛋白胨中的色氨酸被大腸埃希氏菌產生的色氨酸酶分解,形成靛基質。靛基質與Kovacs靛基質試劑反應,形成紅紫色醌式化合物,即紅色環。
而陰溝腸桿菌和金黃色葡萄球菌培養管有黃色環,說明這兩株菌均不含有色氨酸酶。


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