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石蕊牛奶實驗


石蕊牛奶培養基

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石蕊牛奶實驗實驗原理:
牛奶中主要含有乳糖、酪蛋白等成分。細菌對牛奶的利用主要是指對乳糖和酪蛋白的分解和利用。牛奶中加入石蕊作為酸堿指示劑和氧化還原指示劑,石蕊中性時呈淡紫色,酸性時呈紅色,堿性時呈藍色,還原時則部分或全部脫色。

細菌對牛奶的利用可分為以下幾種情況:
1. 酸凝固作用:細菌發酵乳糖后,產生很多酸,使石蕊牛奶變紅,當酸度很高時,可使牛奶凝固,此稱為酸凝固。
2. 胨化作用:酪蛋白被水解,使牛奶變成清亮透明的液體。胨化作用可以在酸性或堿性條件下進行,一般石蕊被還原褪色。
3. 凝乳酶凝固作用:某些細菌能分泌凝乳酶,使牛奶中的酪蛋白凝固。
4. 有些細菌可以分解培養基中的酪蛋白,產生堿性物質,使石蕊變藍。

細菌對牛奶的利用可分為以下幾種情況:
1. 用待試菌18-24h培養物進行梯度稀釋,用接種環從培養平板上挑取菌落于9ml 0.85%生理鹽水試管中,振蕩試管,混合均勻,制成原液。
2. 用移液槍吸取1中樣品勻液 1 mL,沿管壁緩慢注于盛有 9 mL 生理鹽水試管中,振搖試管使其混合均勻,制成 1:10的樣品勻液。
3. 按上述操作程序,制備菌落數大于5000CFU的稀釋菌液。
4. 將稀釋菌液加入石蕊牛奶試管中,于37℃培養箱培養48h。

結果判定:
接種大腸埃希氏菌、肺炎克雷伯氏菌的試管:粉色,凝固,為酸凝固作用;

接種枯草芽孢桿菌的試管:變清,為胨化作用;

接種嗜熱鏈球菌的試管:凝固,為凝乳酶凝固作用;

接種糞產堿桿菌的試管:分解酪蛋白產堿,變藍;

接種唐菖蒲霍爾德氏菌的試管:上層為紫色,下層為白色。


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