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芽孢染色實驗


芽孢染色液

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芽孢染色實驗實驗原理:
芽孢壁厚,透性低,著色、脫色困難,利用著色力強的染色劑在加熱條件下染色時,染料同時進入菌體和芽孢。進入菌體的染料可經水洗脫色,而進入芽孢的染料則難以透出,若再用復染液染色后,芽孢仍然保留初染劑的顏色,而菌體被染成復染液的顏色,即菌體和芽孢分別被染成紅色和綠色來區分。

操作步驟:
1. 取一個載玻片,在其中央滴一滴去離子水,用接種環蘸取少量菌體于去離子水中,涂抹均勻,待干燥后,在火焰上過3次以固定;
2. 滴加3-4滴A液于已經固定的涂片上;
3. 用鑷子夾住載玻片在火焰上持續加熱6-8s(可續加染液以防其蒸干);
4. 加熱完畢待玻片冷卻后,傾去染液,水洗至不再褪色為止;
5. 用B液復染1min,水洗至流出液無色。待玻片干燥后,轉移至顯微鏡油鏡下觀察。

實驗結果:
枯草芽孢桿菌的芽孢呈綠色,菌體呈紅色。

注意事項:
1. 只有在加熱條件下芽孢滲透性發生變化,才能將其染色;
2. 第3步,持續加熱6-8s要使染液冒蒸汽但不能沸騰,并且不能蒸干。

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