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腸桿菌科檢驗(二)確證實驗及計數方法


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腸桿菌科檢驗(二)確證實驗及計數方法典型菌落的確認
腸桿菌科典型菌落為有或無沉淀環的粉紅色至紅色或紫色菌落,選取典型菌落數在15 ~150 CFU之間、無蔓延菌落生長的平板進行計數,從每個平板上至少挑取5個典型菌落,分別劃線接種于營養瓊脂平板上,36℃±1℃培養18h~24h,純化后的平板上菌落應形態大小一致,之后挑取平板上的菌落進行革蘭氏染色鏡檢、氧化酶試驗及葡萄糖發酵試驗。
確證實驗
革蘭氏染色鏡檢:腸桿菌科為革蘭氏陰性桿菌,無芽孢,大小為(0.3~1.0) μm×(1.0~6.0) μm。
氧化酶試驗:用一次性接種環或玻璃棒挑取單個菌落涂于浸濕氧化酶試劑的濾紙上,濾紙的顏色在10s內變成藍紫色,判為陽性反應,不變色為陰性反應,腸桿菌科細菌應為氧化酶陰性。
葡萄糖發酵試驗:挑取少許氧化酶陰性的同一個菌落,穿刺于葡萄糖瓊脂內,于36℃±1℃培養24 h±2 h,若試管內的內容物變為黃色,判為陽性反應。腸桿菌科細菌應為葡萄糖陽性。
計數方法
之后按照視頻中不同情況的計數方法進行計數。

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