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培養基的檢驗與驗收(四)非選擇性增菌培養基的檢驗與驗收


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培養基的檢驗與驗收(四)非選擇性增菌培養基的檢驗與驗收一、非選擇性增菌培養基的介紹
非選擇性增菌培養基常用于細菌的復蘇、活化、增菌培養等,組成為常見的營養成分(如蛋白胨、酵母浸粉、牛肉浸粉等)和鹽類(磷酸鹽、氯化鈉等),一般不具有針對性,適用于多種細菌的生長,對營養成分進行補充也可用于一些特定細菌的培養,添加抗生素或其他抑菌成分也可制成選擇性增菌培養基。
常見的非選擇性增菌培養基有營養肉湯(NB)、胰蛋白胨大豆肉湯(TSB)、腦心浸液肉湯(BHI)、緩沖蛋白胨水(BPW)等。
二、培養基的出廠檢驗
首先,將待測培養基(本次以BHI培養基為例進行講解),按照標簽說明進行配制及滅菌。
之后選擇稀釋至適宜梯度的質控菌的菌懸液(含菌量應在10-100CFU/mL,一般可選擇 -7梯度的稀釋樣液),按照GB4789.28標準,本次質控菌株為金黃色葡萄球菌。吸取1mL加入至待測培養基試管中,接種2支平行,同時使用TSA(或其他適宜培養基)進行傾注,計數接種量,吸取1ml菌液,加入空平皿中,傾入TSA,混勻,放置室溫冷卻,待凝固后,再傾入一層TSA,待其凝固后 , 置于標準中規定的條件下進行培養。
結果判定:接種目標菌的試管濁度值應達到2。
注:如增菌時間小于8小時,培養結束后吸取10μL菌液需用TSA傾注計數,菌數應大于100CFU。
三、培養基的驗收方法
將質控菌株接種至非選擇性肉湯培養基中過夜培養,稀釋至10-3,也可采用其他方法制備含菌量105-107CFU/mL的菌懸液,使用1μL接種環挑取1環菌液,接種至待測培養基中,置于標準規定的條件進行培養。
結果判定:接種目標菌的試管濁度值應達到2。

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