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蘋果的莖尖培養



錄入時間:2012-2-29 16:18:35 來源:互聯網

蘋果的莖尖培養

(一)從健壯母株上,選取帶芽或莖尖的莖段,先用70~75%的酒精浸30~60s,再用10%的次氯酸鈉溶液浸泡10~15 min,或用0.1%升汞液浸5~7 min,最后用無菌水洗3~5次。

(二)剝取莖尖材料接種。為了培養無病毒苗,取的莖尖材料應小,一般為0.1~0.2㎜。為了加速無病毒材料的繁殖,或切取較大的莖尖,約0.3~0.5㎜大小,甚至帶芽的較大莖段,如1~3㎜。莖尖的大小同培養的難易有關,大的分化率高,分化速度快。所以除了特殊的目的外,寧肯用較大的莖尖。

(三)把莖尖接種在MS或LS+2mg∕LBA+300~500mg∕L CH或LH+3%蔗糖的培養基上,誘導芽的分化。在25~30℃和光照下,先培養7~10d,見莖尖膨大轉綠,再培養在黑暗中,可加快分化和綠化苗的生長。一般在暗培養中增殖2~3代。隨后要轉入光照下,以使苗生長健壯。光強以1500~2000Lx為宜。

(四)把伸長的芽接種到MS+0.5~1mg∕L? BA+300 mg∕L CH或改良的MS+4.4umolBA+0.5~49umolGA3的培養基上,這時苗會長大并產生叢生苗。每4~8周可分別繁殖一次,每個月約可增殖5~10倍。

(五)切取2㎝以上的帶頂芽的苗切段,插入1∕2MS或其它低鹽培養基(如White和Nitsh)中,附加1mg∕LIAA、0.2mg∕LIBA和3mg∕LGA3,可有效地促進生根。

    對生根困難的蘋果砧木M9的試管苗生根,以先接種在含有2 mg∕L IBA、162 mg∕L 根皮酚的LS培養基上,培養4~7d后,轉入無激素的LS培養基,生根快而頻率高。

(六)蘋果的試管苗也可以不進行生根,而直接嫁接到蘋果矮化砧木上,既可保持樹體有良好的矮化特性,又可通過采用無病毒繁殖材料妥善地解決無病毒繁殖問題。

(七)生根苗移出進行砂培2~3周,最后在土壤中培養,其成活率可達26.7~56.9%。

 

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