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草莓組織培養



錄入時間:2011-12-31 9:27:08 來源:互聯網

 

    草莓的形態特征和生物學特性 

草莓(Fragaria spp.)為重要的漿果植物,栽培分布很廣,其總產量在漿果類中僅次于葡萄,居世界第二位。草莓果實柔軟多汁,含豐富的糖、酸、礦物質,維生素等。草莓可鮮食,也可加工成果醬,果酒等。其顏色鮮艷,是良好的配餐食品。 

草莓繁殖容易,結果早,收效快。尤其是近年的促成栽培,利用塑料大棚、日光溫室,使草莓的成熟期大大縮短,從每年的11月份到次年的6月份,都有新鮮草莓上市,填補了水果的淡季市場。 

1)形態特征 草莓屬多年生草本植物,植株矮小,呈半平臥叢狀生長,根系為須根系,在土壤中分布較淺。草莓的莖呈短縮狀,分地上和地下部分,地上短縮莖節間極短,節密集,其上密集輪生葉片,葉腋部位著生腋芽。地下短縮莖為多年生,是貯存營養物質的器官,也可發育成不定根。匍匐莖是草莓的特殊地上莖,是其營養繁殖器官,莖細,節間長,一般座果后期發生。葉屬于基生三出復葉,呈螺旋狀排列,在當年生新莖上總葉柄部與新莖連接部分,有兩片托葉頂端膨大,圓錐形且肉質化。離生雄蕊2035枚。雌蕊離生,呈螺旋狀排列在花托上,數目從60600不等。花序為二歧聚傘花序至多歧聚傘花序。果實為假果,主要是花托膨大肉質化形成,瘦果以聚合果形式生于花托上。果實成熟時果肉紅色,粉紅色或白色。 

2)生物學特性 草莓根系在土壤溫度達到2℃時開始活動,在10℃時開始形成新根,根系生長的最適溫度為1520℃,秋季溫度降低到78℃時生長減弱。春季氣溫達5℃時植株開始萌芽,莖葉開始生長。草莓是喜光植物,但又比較耐蔭。光照充足,植物生長旺盛,葉片顏色深,花芽發育好,能獲得較高的產量。相反光照不良,植株生長勢弱,葉柄及花序柄細。葉片色淺,花朵小,果實小,著色不良。草莓的根系分布較淺,加上植株矮小,而葉片則較大,因此蒸發量大。在整個生長季節,葉片幾乎都在不斷地進行老葉死亡、新葉發生的過程,葉片更新頻繁。這些特點,決定了草莓對水分要求較高。但在不同的生長發育時期,對水分的要求不同。開花期土壤的含水量應不低于最大田間持水量的70%。果實膨大及成熟期土壤含水量應不低于80%,而秋季9、10月份,土壤持水量達60%即可,草莓不耐澇,要求土壤既有充足的水分供應,又要有良好的通氣條件。草莓對土壤適應性強,在各種土壤上都能生長。但由于是淺根性作物,要求肥沃、疏松、透水、通氣的中性、微酸性或微堿性土壤。 

栽培方法 

在自然條件下,草莓用匍匐莖分株法繁殖,這種方法繁殖系數高,保持了母本的優良性狀。在繁殖圃設1m寬行距,5060cm株距定植,從5月到9月均可繁殖。圃內保證肥水供應,保持土壤濕潤、疏松,減少結果量。匍匐莖發生后,將其向母株四周拉開,排列均勻,并在偶數節上壓土促發根系,每條匍匐莖上可形成35個壯實的子幼苗,待莖苗長到34片葉時可以移出,作為定植苗用。移出時每株小苗靠母株一側的匍匐莖留2cm長剪斷,另一側齊根剪斷。起出的苗可進行假植,假植寬度以15×15cm為宜,假植深度以根和葉柄分界線埋入土壤1cm為宜,假植后要做好管理工作。

 

草莓的脫毒苗培養

1)熱處理脫毒

將草莓植株在4041℃溫度下處理46周,然后取微莖尖培養。

2)微莖尖脫毒 

①初代培養 取草莓生長健壯的母株或匍匐莖上的頂芽,用自來水流水沖洗24h,然后剝去外層葉片,在無菌條件下,用0.5%次氯酸鈉溶液表面消毒5min,并不停地攪動促進藥液的滲透。在無菌條件和解剖顯微鏡下剝取莖尖分生組織,以帶有1個葉原基的莖尖為好。0.2mm的莖尖無病毒率可達到100%,但接種后的成活率下降,并延長培養時間。莖尖分離后,迅速接入培養基MS+BA0.25+NAA0.25White+IAA0.1中。培養條件為2225℃,日照1618h/d,光強3000Lx。經23個月的培養,可生長分化出芽叢,一般每簇芽叢含2030個小芽為適。注意在低溫和短日照下,莖尖有可能進入休眠,所以較高的溫度和充足的光照時間必須保證。 

②繼代培養 把芽叢割成芽叢小塊,轉入MS培養基中,令其長大,以利分株,待苗長大到12cm時,可將芽叢小塊分成單株,再轉入前述的分化培養基中,又會重復上述過程,達到擴大繁殖的目的。 

③生根培養 在培養基中加入NAA 1mg/LIBA 1mg/L,使發根整齊,由于草莓地下部分生長加快,發根力較強,也可將具有兩片以上正常葉的新莖從試管中取出進行試管外生根。 

④馴化 用鑷子把草莓苗從試管瓶中取出,洗掉根系附帶的瓊脂培養基。事先備好8×8cm6×6cm的塑料營養缽,內裝等量的腐殖土和河砂。栽前壓實,澆透水,用竹簽在缽中央打一小孔,將試管苗插入其中,壓實苗基部周圍基質,栽后輕澆薄水,以利幼苗基部和基質密合。 

栽后的試管苗要培養在濕度較大的空間內,一般加設小拱棚保濕,并經常澆水,以增加棚內濕度,以見到塑料薄膜內表面分布均勻的小水珠為宜。約過710d 后。當檢查有一定的根系生出,可逐漸降低濕度和土壤含水量,進入正常幼苗的生長發育管理階段。 

 花藥(Pollen)培養 

花藥培養操作簡單,因經愈傷組織途徑,再分化得到的即為無病毒苗,所以可免去病毒鑒定工作。 

1)取材與培養

取花粉發育單核期的花蕾,置于潔凈培養皿中,內放一層濾紙,滴蒸餾水數滴保濕。將處理放入34℃冰箱中低溫保存34d。經預處理的花蕾先在70%酒精中浸泡半分鐘,取出放入新配制的飽和漂白粉上清液中消毒10min,用無菌水沖冼3次。然后在超凈工作臺上剝取花藥,立即接種;ǚ郯l育時期可采用醋酸洋紅壓片簽定,培養基為MS+2.4D 0.4 +IAA2。去分化階段培養條件為2426℃,10h/d,1500Lx,20d后可產生乳白色的愈傷組織。 

2)植株分化 

將誘導出的花藥愈傷組織轉移至1/2 MS基本培養基中,添加GA 0.5,BA 0.5和三十烷醇4mg/L。愈傷組織經培養后很快轉綠,以后微帶淡紫紅色,15d后在表面分化出半球形小突起,轉為綠色。20天后分化出幼葉、幼莖,并有不少突起物,以后陸續分化出新梢。   

草莓無病毒苗的鑒定Identification 

草莓花藥培養得到的為無病毒苗,而用生長點培養得到的植株,則必須經過病毒鑒定,確定其不帶病毒,才可以大量繁殖,用于生產。 

1)草莓病毒的種類 

草莓病毒主要有四種,為斑駁病毒,皺葉病毒,脈結病毒和輕型黃邊病毒。斑駁病毒在EMC指示植物上表現不整齊的黃色小斑點;皺葉病毒在指示植物UC1上產生不整齊的小斑點,以及不整齊的葉脈,葉柄暗褐色;脈結病毒在指示植物EMC上表現小葉向后反轉成風車狀,尖端卷曲,葉脈成帶狀褪綠;輕型黃邊病毒在EMC指示植物產生紅葉,數日即枯。 

2)草莓病毒的鑒定方法 

因草莓的病毒在通過汁液接種時不感染,所以通常采用小葉嫁接法來進行鑒定。 

首先從被鑒定的草莓上采集長成不久的新葉,除去兩邊的小葉,中央的小葉帶11.5cm的葉柄,把它削成楔形作接穗。而指示植物則除去中間的小葉,在葉柄的中央用刀切入11.5cm,再插入接穗,用線把接合部位包扎好。為了防止干燥,在接合部位涂上少量的凡士林。為保證成活,在二周內,可罩上塑料袋,置于半見光的場所。約經兩周時間,撤去塑料袋。若帶有病毒,嫁接后12個月,在新展開的葉、匍匐莖或老葉上會出現病癥。

草莓無病毒苗的繁殖和利用(Propagation and Utilization) 

1)防止蚜蟲的危害 

草莓無病毒苗的繁殖重要的是要防止無病毒苗的再度污染。由于草莓病毒主要是蚜蟲傳播的,所以要搞好防蚜蟲工作。傳播草莓病毒的主要有草莓莖蚜、桃蚜和棉蚜。其中分布最廣泛的是草莓莖蚜,莖蚜的身體著生有釘狀的毛,可以寄生在寄主的全株各個部位上。一草一木防治時可使用馬拉松乳劑,氧化樂果乳劑等接觸殺蟲劑,防治期在56月和910月,特別是910月一次,可防止蚜蟲的越冬。     

為保證種苗的無病毒,在原種種苗生產階段,應在隔離網室中進行。傳播草莓病毒的蚜蟲較小,可以通過大于1mm網眼,故應采用0.40.5mm大小的規格,其中以300號防蟲網為好。 

2)繁殖程序及提高繁殖率的措施 

草莓無毒苗的繁殖程序可分五步,包括病毒鑒定生產出無毒苗、原種種苗培養、原種種苗繁殖、良種種苗繁殖,生產用苗繁殖和栽培苗繁殖,前四步在隔離室中進行,后一步露地進行。為提高無病毒母株的繁殖株數可采用赤霉素處理和摘蕾的方法。赤霉素處理用5ppm的濃度,每株5ml,在5月上旬和6月上旬分兩次進行。摘蕾可減輕母株的營養負擔,促使匍匐莖的大量發生,田間地每一株可繁殖150200株。 

3)生產管理工作 

 母株必須保證每株有大于3.3m2的營養面積。再是注意匍匐莖排列位置,不要交錯重疊,不利采苗,采苗也要適時進行。無論秋季或春季種植,繁殖床必須要進行土壤消毒,小面積可用蒸氣劑料混合消毒,可防治草莓萎縮病、根腐病、萎凋病等的發生。 

隔離繁殖圃通常施緩效性肥料,每公畝用3t肥;為促使匍匐莖發生,要經常灌水。

 

 

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