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支原體污染相關內容



錄入時間:2011-6-28 15:01:01 來源:青島海博

各國細胞庫支原體污染的統計表
國家   受支原體污染(%)  報告年度
USA-FDA  15  1993(past 30 years)
USA-ATCC  15-20  1992
Japan-(IFO,RIKEN,JCR 80~30~22  1981 1987-19931998
Germany-DSM  36  1990-1994
Argentina  65  1987
Israel  32  1986-1993
China  95   1990
 
造成支原體高污染率的原因為: 
1.支原體size 0.1~0.8 um,無細胞壁,可透過一般過濾膜(0.22-0.45 um) 
2.支原體污染時,沒有明顯的肉眼或一般光學顯微鏡可觀察到的特征變化 
3.過去缺乏簡單、快速且可靠的檢測方式 
4.細胞流通間缺乏品管,造成實驗室間的相互污染 
5.研究或操作人員忽略污染問題 
 
支原體污染了來源: 
1.  已受污染的細胞 
2.  操作人員的疏失 
3.  已受污染的培養基、血清 
4.  操作環境不良、實驗器具不潔等 
由于支原體為人體口腔中之正常菌叢,實驗室之操作人員的污染亦可能為污染源,須十分注意。而萬一細胞已受支原體污染時,最佳的處理原則為將細胞高壓滅菌后丟棄,以免污染其它潔凈的細胞株。但是若是堅持要作去除支原體污染,有以下幾種方法,只不過結果會與原始的細胞特性有差異。
 
去除支原體污染: 
1. 抗生素處理:BM-cyclin(Roche),MRA(mycoplasma removal agent,ICN),Ciprofloxcin(Bayer),Enrofloxacin(Bayer) 
2. Nucleic acid metabolites:5-bromouracil,Hoechst 33258,bromodeoxyuridine 
3. Anti-sera 
 
預防與控制方面可從以下各點加強注意:
 設備方面: 
1.  使用已作支原體測試ok之細胞株 
2.  于另一隔離之區域操作未知是否有支原體污染之細胞 
3.  使用不添加抗生素的培養基培養細胞 
 檢測方面:定期以標準的支原體檢測方法檢測細胞、培養基、血清、ddH2O有否被支原體污染。
 實驗操作人員之無菌觀念與無菌操作技術之要求

 

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