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塞克硝唑對口腔厭氧病原菌體外抗菌活性的測定



錄入時間:2011-1-6 10:36:11 來源:中國論文下載中心

 

【摘要】  目的 測定實驗藥物塞克硝唑對口腔厭氧病原菌的體外抗菌作用。方法 本試驗采用美國國立臨床實驗室標準化研究所(CLSI/NCCLS)推薦的厭氧菌藥物敏感試驗-瓊脂稀釋法,檢測塞克硝唑對6株模式株和參考株及35株口腔臨床分離株的體外抗菌活性,并與同類藥物甲硝唑進行比較。結果塞克硝唑和甲硝唑對6株模式株和參考株的MIC值分別是0.0620.5μg/ml、0.1250.5μg/ml;對35株臨床分離株的MIC值分別是0.0310.5μg/ml、0.0311.0μg/ml。結論 塞克硝唑與甲硝唑相比體外抗厭氧菌活性相似或略強。

【關鍵詞】  塞克硝唑; 抑菌實驗; 厭氧菌; MIC

 

    口腔臨床常見的感染性疾病如牙周炎、冠周炎均為厭氧菌感染為主的疾病,厭氧菌檢出率在95%左右。5-硝基咪唑類藥物[如甲硝唑(MTZ)等]被認為是抗無芽孢厭氧菌感染效果較好的藥物。塞克硝唑(secnidazole,SNZ)是近年來國外臨床廣泛使用的安全、有效的抗脆弱擬桿菌、幽門螺桿菌、陰道滴蟲及腸道阿米巴的5-硝基咪唑類藥物[1,2]。與其它5-硝基咪唑類藥物相比,具有有效血藥濃度維持時間長(1729h)3]、不良反應少等優點[4,5]。目前國內塞克硝唑僅應用于婦科感染性疾病的治療,還未見用于口腔感染性疾病的治療,為進一步了解塞克硝唑對口腔厭氧菌株的敏感性,本文對塞克硝唑進行體外抑菌實驗,為本品在口腔臨床抗厭氧菌感染中的應用提供有意義的實驗數據。

    1  材料與方法

    1.1  材料

    (1)實驗藥和對照藥

    實驗藥  塞克硝唑原藥粉,白色粉劑,批號20041216,由浙江南洋藥業股份有限公司提供。

    對照藥  甲硝唑原藥粉,白色粉劑、批號HEC-ME-040634,由浙江南洋藥業股份有限公司提供。

    (2)實驗菌株  選擇口腔臨床常見的厭氧病原菌菌株作為本實驗的實驗菌株,其中模式株和參考菌株6株,臨床分離株35株,均從口腔臨床牙周炎患者的病灶位點分離。質控株脆弱擬桿菌ATCC25285;實驗菌株(模式株和參考菌株)6株:牙齦卟啉單胞菌(Porphynomonas gingivalis)ATCC33277,牙齦卟啉單胞菌381,牙髓卟啉單胞菌(Porphyromonas endodentalis)ATCC34506,中間普雷沃菌(Prevotella intermedia)ATCC25611,產黑素普雷沃菌(Prevotella melaninogenica)ATCC13040,具核梭桿菌(Fusobacterium nucleatum)ATCC10953。

    (3)培養基  Brain-heart infusion-S(BHI-S),Bio-Merieux產品,批號51009。

    (4)厭氧孵育箱  DYII型,浙江義烏。

    1.2  方法

    采用美國臨床實驗室標準化研究所(CLSI/NCCLS)推薦的厭氧菌藥物敏感試驗(Antimicrobial Susceptibility Testing of Anaerobes) 瓊脂稀釋法(Agar Dilution Method)測定實驗藥物和對照藥物的抗菌活性,用最小抑菌濃度(minimum inhibitory concentration,MIC)表示。

(1)藥物實驗液和含藥瓊脂平皿的配制

    藥物實驗貯存液的配制  實驗藥和對照藥均用無菌蒸餾水配制成藥物濃度為5120μg/ml的貯存液(-4保存一周)。

    含藥瓊脂平皿的配制  采用對倍稀釋法,用BHI液體培養基分別將實驗藥和對照藥的貯存液(5120 μg/ml)配制成系列濃度的實驗藥液: 2560、1280、640、320、160、80、40、20、10、5、2.5、1.25、0.620.31μg/ml。分別取上述不同濃度的藥物實驗液2ml18ml濃度為4850BHI-S瓊脂混合均勻后傾注平皿,配制系列對倍遞減濃度的含藥瓊脂平皿(256、128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125、0.0620.031μg/ml)。

    (2)實驗細菌液的準備  BHI-S瓊脂表面接種實驗菌株,置厭氧培養箱內(80% N2+10% CO2+10% H2)培養48h,取48h純培養物接種BHI-S肉湯后放置厭氧培養箱內(80% N2+10% CO2+10% H2)培養48h,校正實驗菌液的濃度為0.5McFarland(108CFU/ml)備用。

    (3)MIC測定  在系列含藥平皿表面用微量加樣器分別點種細菌濁度為108CFU/ml(0.5 McFarland標準)的實驗菌液,點種量為7μl。將點種細菌的實驗平皿放置在厭氧箱內(80% N2+10% CO2+10% H2)培養48h。實驗菌對照:將實驗菌液點種在不含藥液的BHI-S瓊脂表面。厭氧培養(80% N2+10% CO2+10% H2)48h后觀察MIC結果。

    2  結果

    由表1可見塞克硝唑和甲硝唑對質控菌株脆弱擬桿菌ATCC25285MIC的測定值與CLSI/NCCLS公布的參考值接近。對6株模式株和參考株的MIC值分別為0.0620.5μg/ml、0.1250.5μg/ml,對35株臨床分離株的MIC分別為0.0310.5μg/ml、0.0311.0μg/ml。結果提示,與甲硝唑相比較,塞克硝唑對這幾種厭氧菌的體外抗菌活性相似或略強。表1    塞克硝唑(SNZ)和甲硝唑(MTZ)對實驗細菌的

    3  討論

    塞克硝唑與甲硝唑同屬5-硝基咪唑類藥物,其抗菌譜與硝基咪唑類其它抗菌藥物沒有明顯差異。與甲硝唑相比,塞克硝唑的藥動學特性如生物利用度、存在活性代謝物和終末消除半衰期(塞克硝唑t1/2β1729h,甲硝唑為78h)主要表現量的差異,出現差異的原因是由于氮環上結合于硝基鄰近的取代基決定的。國外塞克硝唑主要用于治療阿米巴、賈第鞭毛蟲、滴蟲和細菌性陰道炎,絕大多數都是使用單劑方案[5,6],單劑治療是塞克硝唑的最大特點,有報道塞克硝唑在牙齦組織內藥物濃度與血藥濃度大體平行[7],說明該藥對牙齦組織有較好的穿透作用,同時該藥在牙齦組織的半衰期長達28.8h。該藥口服吸收好,口服和靜脈給藥差異無顯著性[8]口腔臨床常見的牙周炎和冠周炎均以厭氧菌感染為主,本實驗通過塞克硝唑和甲硝唑對6株模式株和參考株及35株臨床分離株的測定表明,塞克硝唑的體外抗厭養菌活性相似或略強于甲硝唑。鑒于塞克硝唑的血液維持濃度較長,胃腸道不良反應小,耐受性良好,單劑口服方便等特點,塞克硝唑在治療口腔厭氧菌感染方面有較大的應用前景。

 作者:于佳輝 李淼 肖麗英  丁一 肖曉蓉 朱珠 龔其美《中國抗生素雜志》

【參考文獻】

  1 Nunez J T, Gomez G. Low-dose secnidazole in the treatment of bacterial vaginosis J. Int J Gynecol Obstet,2005,(3):281

2 Bhatio S, Karnad D R, Oak J l. Randomized double-blind trial of metronidazole versus secnidazole in amebic liver abscess J. India J Gastroenterol,1998,17(2):53

3 Gillis J C, Wiseman L R. Secnidazole: a review of its antimicrobial activity, pharmacokinetic properties and therapeutic use in the management of protozoal infections and bacterial viginosis J. Drugs,1996,51(4):621

4 Acar J, Petitjean O, Dubreuil L. Secnidazole, a new 5-nitro-imidazole J. Antibiotiques,2005,7(3):177

5 Sodein K, Syukran O, Fadillah A, et al. Comparison between the efficacy of a single dose of secnidazole with a five day course of tetracycline and clioquinol in the treatment of acute intestinal amebiasis J. Pharmaceutica,1985,4(4):251

6 Di Prisco M C, Jmenez J C, Rodrguez N, et al. Clinical trial with secnidazole in a single dose in Venezuelan children infected by Giardia intestinalis J. Invest Clin,2000,41(3):179

7 Tenenbaum H, Cuisinier F J G, Le Liboux, et al. Secindazole concentrations in plasma and crevicular fluid after a single oral dose J. J Clin Periodontol,1993,20(7):505

8 Lamp K C, Freeman C D, Klutman N E, et al. Pharmacokinetics and pharmacodynamics of the nitroinidazole antimicrobials J. Clin Pharmaco Kinet,1999,36(5):353

 

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