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正交試驗優化菊花組織培養條件一



錄入時間:2009-6-30 14:20:44 來源:青島海博

摘要:通過菊花無菌苗體系建立、愈傷組織誘導、不定芽分化、不定根誘導試驗,發現用0.2 % HgCl2對葉片、莖尖消毒3 - 4 min 建立無菌苗體系較好;2 , 4 D 0.5mg/L 、6 BA 0.5mg/L 對愈傷組織的誘導較好;生長素NAA 0.lmg/L 、IBA 0.1 mg/L 、2 , 4 D 0.lmg/L 和細胞分裂素6 BA 1.0mg/L 、ZET 1.0mg/L、2 ip 1.Omg/L 對不定芽分化形成均有較好效果。
關鍵詞:菊花;組織培養;正交試驗;激素

菊花為菊科多年生草本植物,具有觀賞及藥用價值。菊花喜涼爽、較耐寒,生長適溫18 21 ,在微酸性至微堿性土壤中皆能生長,以pH 6.2 6.7 最好川。菊花味甘、苦,微寒。歸肺、肝經川;ê腿莺瑩]發油,成分有菊油環酮、蠟狀物、單龍腦酞酸酷、菊醇利黃酮類成分、木褲草素一7 一葡萄糖昔二水合物等[51 。具有散風清熱、平肝明目之功效,可用于風熱感冒、頭痛眩暈、目赤腫痛、眼目昏花的治療。本試驗的目的旨在通過正交試驗優化菊花組織培養的條件。

材料與方法

1.1 材料
菊花采自楚雄師范學院校園,4 個品種代號分別為品種l 、品種2 、品種3 、品種4 。
1.2
方法
采用正交試驗設計,結果用SPss 11.5 軟件進行統計分析。
1.2.1
不同外植體部位、不同消毒時間對菊花無菌苗體系建立的影響試驗采用1/2MS 。為基本培養基,選取菊花莖尖、葉片、根,用0.2 % Hgcl2 分別處理3 min 、4 min 、5 min, 進行單因素多水平對照試驗。每組試驗接5 瓶,每瓶接種4 個材料,暗處理7d 后觀察。
1.2.2
不同外植體部位、基本培養基類型及激素組合對菊花愈傷組織誘導的影響試驗采用5 因素4 水平正交試驗,每組試驗接5 瓶,每瓶接種4 個材料。因素水平見表1 。
1.2.3
不同來源的愈傷組織、基本培養基類型及激素組合、蔗糖濃度對誘導菊花愈傷組織分化形成不定芽的影響試驗采用5 因素4 水平正交試驗,每組試驗接5 瓶,每瓶接種4 個材料。因素水平見表2 。
2
結果與分析
2.1
不同外植體部位、不同消毒時間對菊花無菌苗體系建立的影響
方差分析結果表明,消毒時間、外植體部位對成活率的影響分別為極顯著(P=0.001 < 0.01 )和顯著(P=0.028 < 0.05 )。多重比較結果(表3 )表明,消毒3 min 4 min 的成活率極顯著優于5 min ;消毒3 min 4 min 對成活率的影響不顯著,均具有較好的消毒效果。外植體水平l (葉片)、3 (根)對成活率的影響差異不顯著,且均極顯著優于水平2 (莖尖),因此葉片、根在菊花無菌苗體系建立中均可以使用。

 

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