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支原體采樣管使用說明

劉浩然
錄入時間:2024-3-7 13:39:25 來源:青島海博生物

一、肺炎支原體發病簡介

  肺炎支原體是人類支原體肺炎病原體,一旦感染難以完全根治。肺炎支原體感染呼吸道后能借助滑行運動定位于纖毛之間,通過粘附細胞器上的P1黏附素等,黏附于上皮細胞表面,抵抗黏膜纖毛的清除和吞噬細胞的吞噬,并伸出微管插入胞內吸取營養,繼而合成過氧化氫等,從而導致細胞的溶解和上皮細胞的氧化應激反應,進而引起炎癥。由于肺炎支原體和人體部分組織之間有共同的抗原,在發生肺炎感染之后還可能引起多系統多器官的免疫損害。若是幼兒感染了肺炎支原體,由于自身免疫功能和其他系統器官等的發育不完善,會導致損傷更為嚴重。不過臨床有部分患者癥狀較輕或無癥狀。

  為肺炎支原體樣本的采集、轉運保存,我公司專門推出支原體采樣管(貨號:HBPT077)。


二、支原體采樣管的檢驗原理

  酵母浸粉、肉浸粉和血清提供的營養可保證支原體的存活與生長,肺炎支原體生長時可分解葡萄糖產酸導致pH下降,采樣管顏色由紅變黃,青霉素可抑制多數細菌的生長。


三、支原體采樣管的使用方法

  1. 采樣:取一支支原體采樣管,采樣前打開包裝,該產品配備有采樣拭子、采樣管、安全袋,在規定的采樣部位進行樣本采集,可采用最常見的咽拭子采樣法,咽拭子的采樣手勢如圖1所示,采樣時,先請被檢測者張開口,用該消毒過的采樣拭子在咽部拭取分泌物,然后放入采樣管中,折斷拭子尾部手柄,并將尾部手柄放入安全袋中滅菌處理,擰緊采樣管后,標記采樣管采樣人、采樣具體時間、采樣地點等信息,隨后將支原體采樣管放入新開啟的安全袋中,用于送樣檢測。

圖1 咽拭子的采樣手勢

  2. 培養:運送采樣管至實驗室,若當天檢測可置于4℃冷藏后培養或提取核酸,將該采樣管置于36℃培養箱中培養1-3天,若該陽性管由紅變黃或為橙黃,且無沉淀或菌膜,報告陽性結果。若采樣管出現沉淀或者菌膜,該陽性變化也可能是細菌污染導致的假陽性。當天不檢驗應-20℃以下低溫凍存,避免操作前再次凍融。


四、支原體采樣管性能

  1. 外觀:本品為紅色透明液體狀。

  2. 靈敏度:接種濃度為108CCU/mL的肺炎支原體(ATCC 15531),放置36℃±1℃需氧培養1 d時已有陽性變化,培養至41 h時,結果應為明顯的陽性,如圖2所示。

圖2 接種肺炎支原體培養后的陽性變化

  3. 特異性:分別接種1000 CFU的大腸埃希氏菌ATCC 25922、金黃色葡萄球菌ATCC 25923、沙門氏菌ATCC 14028至支原體采樣管中,放置36℃±1℃需氧培養1-2天后,結果為陰性,如圖3所示。

圖3 支原體采樣管對常見菌株的抑制作用


五、補充內容-支原體平板培養

  雖然支原體采樣管中加入了青霉素可抑制大多數雜菌,但仍然有部分雜菌是無法被抑制的,這就可能造成個別假陽性結果,假陽性的表現一般為培養液由紅變黃,同時還出現漂浮著的菌膜、培養液底部出現沉淀、培養液變渾濁等現象,如圖4所示。

圖4 培養液假陽性示例圖

(左3支為污染示例,右1支為空白對照)

  假陽性現象會干擾結果的判斷,有條件允許的情況下除提取核酸外,還可進行固體平板培養,我公司有相應的支原體瓊脂培養基平板(貨號:HB7025-3),肺炎支原體在固體平板上的生長狀態如圖5所示。

圖5 肺炎支原體在固體平板上的生長狀態

  肺炎支原體菌落染色鏡檢形態如圖6所示。

圖6 肺炎支原體菌落染色鏡檢


六、支原體采樣管使用的注意事項

  1. 本品不用于臨床診斷;

  2. 使用后的培養基應進行消毒處理;

  3. 本產品只適用于經過培訓的實驗人員使用;

  4. 本產品使用時,應戴手套和口罩做好防護措施;

  5. 產品出現污染,變色,漏液或過期時應禁止使用;

  6. 樣本標記信息應清晰,樣品應及時送檢以提高準確性。


相關產品:

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注:本文屬海博生物原創,未經允許不得轉載。

 

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