<font id="jjl7t"></font>
<video id="jjl7t"><dl id="jjl7t"><i id="jjl7t"></i></dl></video>
<dl id="jjl7t"><i id="jjl7t"></i></dl>
<video id="jjl7t"></video><dl id="jjl7t"></dl><video id="jjl7t"><i id="jjl7t"></i></video>
<dl id="jjl7t"></dl><dl id="jjl7t"><i id="jjl7t"><delect id="jjl7t"></delect></i></dl><dl id="jjl7t"></dl><dl id="jjl7t"></dl><noframes id="jjl7t">
<video id="jjl7t"></video>
<video id="jjl7t"><delect id="jjl7t"><delect id="jjl7t"></delect></delect></video><video id="jjl7t"><i id="jjl7t"></i></video>
<video id="jjl7t"></video><i id="jjl7t"></i>
<video id="jjl7t"></video>
<video id="jjl7t"></video>
中文版  |   English  |   加入收藏  |   客服熱線:400-0532-596
微生物技術資料
文章檢索
  首頁 > 微生物知識->海博原創文章——知識拓展->人肺炎支原體、豬肺炎支原體、口腔支原體固體平板法及染色鏡檢

人肺炎支原體、豬肺炎支原體、口腔支原體固體平板法及染色鏡檢

劉浩然
錄入時間:2024-1-24 10:30:52 來源:青島海博生物

一、支原體簡介

  支原體結構簡單,缺乏細胞壁,僅有質膜,胞體內有核蛋白體以及一個由環形雙鏈DNA分子組成的原核。支原體大小僅有0.1μm~0.3μm,最小直徑約為100nm,可通過細菌濾器,會干擾細胞培養等工作的進行。由于其能形成絲狀與分枝形狀,故稱為支原體。

  不同支原體利用的能源物質不同,如肺炎支原體、人型支原體等可發酵葡萄糖,口腔支原體可水解精氨酸,還有解脲支原體可利用尿素作為能源。我們可通過發酵葡萄糖、水解精氨酸、水解尿素等生化反應鑒別支原體。

  支原體營養要求一般比細菌高,除必須的基礎營養物質外,還需添加10%~20%的動物血清以提供支原體所需的助生長因子。由于大多數的支原體兼性厭氧,有些菌株在活化分離時保持5%~10%二氧化碳環境生長狀態更好。解脲支原體在厭氧條件下生長更好。

  支原體無細胞壁,對滲透壓敏感,對抑制細胞壁合成的抗生素不敏感,因此可添加青霉素抑制細菌的生長。由于滲透壓突變會導致支原體破裂死亡,因此培養支原體時,維持適宜的滲透壓顯得格外重要。此外,在支原體培養中,pH也是重要因素。

  支原體在固體平板培養基上的菌落狀態為煎蛋狀,這種菌落狀態也是因為支原體沒有細胞壁的緣故,支原體向培養基內部生長形成“蛋黃”部分,支原體在培養基表面生長便形成了“蛋清”部分。


二、肺炎支原體、口腔支原體檢驗依據及原理

  人肺炎支原體檢查法在2020年版《中華人民共和國藥典》中體現,要求使用支原體肉湯培養基(貨號為HB7025-2,可參考文章支原體肉湯培養基的原理和使用方法)培養監測肺炎支原體。具體操作要求為:將肺炎支原體稀釋至10-7~10-9,接種在支原體肉湯培養基中,每個稀釋度接種3支試管,置于36℃培養7-14天,觀察培養基變色結果。肺炎支原體可以發酵培養基中的葡萄糖,使培養基的pH值降低,遇指示劑酚紅使培養基變黃。

  豬肺炎支原體檢查的方法在中國藥典中無具體要求,我們可以參照人肺炎支原體檢查法。

  口腔支原體檢查法在2020年版《中華人民共和國藥典》中體現,要求使用精氨酸支原體肉湯培養基(貨號為HB7025-5)培養監測口腔支原體。具體操作要求為:將口腔支原體稀釋至10-3~10-5,接種在精氨酸支原體肉湯培養基中,每個稀釋度接種3支試管,置于36℃培養7-14天,觀察培養基變色結果?谇恢гw可以利用培養基中的精氨酸,使培養基pH值升高,遇指示劑酚紅使培養基變紅。


三、支原體固體平板培養的方法

  1.取活化的人肺炎支原體(活化支原體的方法可參照視頻:肺炎支原體的靈敏度試驗方法)、豬肺炎支原體分別接種至支原體肉湯中,并進行10倍梯度稀釋,涂布適宜濃度的稀釋液100μL至支原體瓊脂固體平板上(貨號為HB7025-3),封口膜包住平板邊緣以提供微需氧環境且能有效避免一定的污染,直到培養至光線下可以看到針尖大小的菌落,人肺炎支原體在平板上及鏡檢下的菌落狀態如圖1所示。

 

           

圖1 人肺炎支原體在平板上及鏡檢下的菌落狀態

  豬肺炎支原體在平板上及鏡檢下的菌落狀態如圖2所示。

 

圖2 人肺炎支原體在平板上及鏡檢下的菌落狀態

  2.取活化的口腔支原體接種至精氨酸支原體肉湯中,并進行10倍梯度稀釋,涂布適宜濃度的稀釋液100μL至支原體瓊脂固體平板上(使用貨號為HB7025-1;較HB7025-3不同點在于含精氨酸和酚紅),封口膜包住平板邊緣以提供微需氧環境且能有效避免一定的污染,直到培養至光線下可以看到針尖大小的菌落,口腔支原體在平板上及鏡檢下的菌落狀態如圖3所示。

 

圖3 口腔支原體在平板上及鏡檢下的菌落狀態


四、支原體染色方法及染色后鏡檢結果

  為了增加顏色的對比度,更好的觀察檢測支原體,可采用加染色液的方法對支原體進行染色,染色還可有效排除氣泡的干擾。中國藥典采用的為指示細胞培養法即DNA染色法,需要借助特殊的熒光染料和熒光顯微鏡進行觀察。而一般的實驗室并不具備這樣的條件,因此可以使用更為簡單的染色方法,借助兩種常用的染料及普通電子顯微鏡即可觀察。具體步驟為:將蕃紅染液或結晶紫染液(革蘭氏染色A液;HB8278)稀釋一定的倍數,直接加入到平板上染色10秒,之后用水沖洗掉,無需切割瓊脂塊,直接將平板放置于顯微鏡觀察,人肺炎支原體的染色鏡檢結果如圖4所示。

圖4 人肺炎支原體的染色鏡檢結果

  豬肺炎支原體的染色鏡檢結果如圖5所示。

圖5 豬肺炎支原體的染色鏡檢結果

  口腔支原體的染色鏡檢結果如圖6所示。

圖6 口腔支原體的染色鏡檢結果

五、注意事項

  支原體染色鏡檢方法可參考視頻:口腔支原體固體平板法及染色鏡檢,該視頻詳細展示了固體平板的制備方法及注意細節。


相關產品:

支原體肉湯培養基-點擊查看產品詳情

精氨酸支原體肉湯培養基-點擊查看產品詳情

支原體瓊脂培養基-點擊查看產品詳情

支原體瓊脂培養基(含精氨酸)-點擊查看產品詳情

革蘭氏染色液試劑盒-點擊查看產品詳情



注:本文屬海博生物原創,未經允許不得轉載。

 

上一篇:鑒定類培養基的檢驗方法

下一篇:沒有了!

相關文章:
成人肺炎克雷伯菌敗血癥53例臨床分析
首頁 | 關于我們 | 網上商城 | 在線客服 | 聯系我們
地址:青島市城陽區錦匯路1號A2棟
電話:400-0532-596 0532-66087773
   66087762、81935169
傳真:0532-81935080
郵箱:qdhbywg@vip.126.com
廣東辦事處
羅經理、溫小姐
電話:020-87204426 13711177972
郵箱:LWN7972@126.com
產品技術咨詢
工作日(周一至周六8:00-18:00):
18562658263 13176865511
其它時段:13105190021
投訴與建議
13105190021 13006536294
色国产精品一区在线观看|97超碰中文字幕|8090成人午夜|国产女人与公拘交
<font id="jjl7t"></font>
<video id="jjl7t"><dl id="jjl7t"><i id="jjl7t"></i></dl></video>
<dl id="jjl7t"><i id="jjl7t"></i></dl>
<video id="jjl7t"></video><dl id="jjl7t"></dl><video id="jjl7t"><i id="jjl7t"></i></video>
<dl id="jjl7t"></dl><dl id="jjl7t"><i id="jjl7t"><delect id="jjl7t"></delect></i></dl><dl id="jjl7t"></dl><dl id="jjl7t"></dl><noframes id="jjl7t">
<video id="jjl7t"></video>
<video id="jjl7t"><delect id="jjl7t"><delect id="jjl7t"></delect></delect></video><video id="jjl7t"><i id="jjl7t"></i></video>
<video id="jjl7t"></video><i id="jjl7t"></i>
<video id="jjl7t"></video>
<video id="jjl7t"></video>