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基因工程中的工具酶



錄入時間:2024-1-5 14:10:19 來源:青島海博生物

工具酶從20世紀40年代至60年代,從理論上已經指出了基因體外重組的可能性,但科學家們面對龐大的雙鏈DNA分子束手無策,無法根據需要將DNA分子切割成單個的基因片段,也無法將兩個DNA片段正確地連接起來。限制性核酸內切酶的發現解決了DNA分子的切割問題,1970年,SmithWilcox從流感嗜血桿菌(Haemophilus influenzae)中分離并純化了限制性核酸內切酶Hind Ⅱ;1972年,Boyer實驗室發現了Eco R I核酸內切酶,能夠識別核苷酸鏈上的GAATTC序列;從此以后,相繼發現了各種類似于Eco R I的限制性核酸內切酶,它們可以在特殊的位點切割DNA分子,因此,有人將限制性核酸內切酶形象地稱為長眼睛的剪刀”。

幾乎與此同時的另一項重要發現是DNA連接酶。1967年,世界上有5個實驗室幾乎同時發現了DNA連接酶。這種酶能夠將DNA的裂口修復,將兩條DNA片段按預定的方向重新連接在一起。1970年,美國Khorana實驗室發現了具有更高連接活性的T4 DNA連接酶?梢院敛豢鋸埖卣fDNA連接酶就是重組DNA縫紉針和線。

 

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