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淺談微生物檢驗中的假陽性與假陰性(一)

王天宇
錄入時間:2023-11-15 16:20:36 來源:青島海博生物

  沒有一種培養基能夠一步便100%確定樣品中是否含有某種細菌,檢驗樣品中是否含有某種細菌,往往需要多步生化反應判斷或輔以血清學或PCR檢測。如何在檢驗中抑制干擾菌同時找出我們需要的目標菌,盡量避免出現假陰性(實際樣本含目標菌,但未檢出,此時為假陰性)或假陽性(實際樣本不含目標菌,但檢出,此時為假陽性)一直是微生物檢驗工作中的重點和難點。本系列旨在以GB.4789系列為基礎,淺談可能出現的假陰性與假陽性情況。

  檢驗沙門氏菌屬時,由于其種類繁多,生化反應各異,且在生活中十分常見、送檢樣本多,非常容易在檢驗過程中出現假陽性和假陰性的情況。
  在《GB 4789.4-2016 食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 沙門氏菌檢驗》(下文稱《標準》)中,第一布首先需要進行預增菌,這是為了避免樣品中的沙門氏菌受損活力不佳導致選擇性增菌后無沙門氏菌檢出,導致假陰性。第二步選擇性增菌時,則同時選取了亞硒酸鹽胱氨酸增菌液(SC)和四硫磺酸鹽煌綠增菌液TTB)兩種選擇性增菌培養基來對沙門氏菌進行增菌,這是因為SC與TTB各自的抑菌性不同,對不同種類沙門氏菌的增菌效果也不同。SC的抑菌性相對較弱,TTB抑菌性相對較強。避免選取單一增菌液造成后續結果出現假陰性。

  而在接下來的菌種分離挑選可疑菌落的過程中,則必選亞硫酸鉍(BS)瓊脂,沙門氏菌顯色、HE瓊脂、XLD瓊脂三選一,這也是因為不同培養基,對于不同沙門氏菌的選擇性并不完全相同,這樣選擇可以盡可能提高檢出率避免假陰性。

  在此步驟經常有人會產生疑問,為什么HE、XLD、BS上幾乎所有形態的菌落都被納入了可疑菌落,為什么顯色平皿上已經顯色卻不能直接判定有沙門氏菌?其實,沙門氏菌種類繁多,常見的沙門氏菌多數為硫化氫反應陽性,在HE\XLD\BS上呈現出黑色中心菌落,但也應注意到,部分沙門氏菌,如甲型副傷寒沙門氏菌,硫化氫反應陰性或硫化氫產生較少,此時他們會呈現出無色菌落。部分沙門氏菌,如亞利桑那沙門氏菌,也可發酵乳糖產酸,呈現周圍黃色的菌落而部分變形桿菌屬細菌,也會產生硫化氫,導致菌落產生黑色中心。而《標準》中對于可疑目標菌落的樣式,也有詳細的說明。而沙門顯色培養基,雖然對沙門氏菌具有高度的特異性,但是一些非沙門氏菌屬的細菌,也會呈現紫色(此處紫色為沙門氏菌顯色培養基第二代上沙門氏菌呈現的典型顏色),造成假陽性,因此不能僅憑沙門氏菌顯色平皿的顏色反應就直接判定是否含有沙門氏菌,必須進行下一步的生化鑒定,必要時進行血清學分型。

  由此我們可以發現,在《標準》中,都是為了盡可能的檢出沙門氏菌,避免假陰性,而選用了多種培養基同時進行實驗,在檢驗中是不可以只做某一種或只做某一步的,否則會極大增加假陰性出現的概率。


相關產品:

亞硒酸鹽胱氨酸增菌液(SC)-點擊查看產品詳情

四硫磺酸鹽煌綠增菌液基礎(TTB)-點擊查看產品詳情


相關標準:

GB 4789.4-2016 沙門氏菌檢驗 -點擊下載標準


注:本文屬海博生物原創,未經允許不得轉載。

 

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