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豬肺炎支原體疫苗培養基的原理和使用方法

劉浩然
錄入時間:2023-11-9 15:51:14 來源:青島海博生物

一、用途及試驗原理

  用途:用于豬肺炎支原體的培養。

  原理:蛋白胨,牛心浸粉,酵母浸粉提供氮源,維生素,氨基酸和生長因子。


二、培養基配方(g/L)

蛋白胨

10.0

牛心浸粉

1.6

酵母浸粉

6.0

pH值7.6±0.1(25℃)


三、試驗方法

  1、稱取本品17.6g,加熱溶解于800mL純化水中,121℃高壓滅菌15分鐘,冷卻至室溫,無菌操作加入200 mL豬血清,混勻,分裝,備用。

  2、制備質控菌株,接種至培養基中,做10倍系列稀釋,稀釋至10-9,并做空白對照。

  3、放置于36℃±1℃恒溫培養箱中,微需氧培養7-14天。


四、試驗注意事項

  1、若使用非一次性試管等容器進行試驗,容器使用前應使用蒸餾水沖洗干凈,確保無洗滌液等殘留物,以免增加試驗的不確定性或污染。

  2、滅菌結束后,試管口會有水珠,在進行梯度稀釋時,水珠很容易與空氣中的細菌接觸以致污染,因此,試管口應灼燒至干燥,膠塞也需過火,振蕩操作后,若培養基接觸到膠塞,還需再次進行灼燒操作。

  3、調節pH時,使用的酸堿試劑需是無菌的。

  4、支原體培養前應使用封口膜封口,可提供微需氧環境以及降低污染的風險。


五、質控結果

  接種以下質控菌株,放置于36℃±1℃恒溫培養箱中,需氧培養7-14天。豬肺炎支原體培養至11天的試驗結果如圖1所示。

質控菌株

菌株編號

接種量(CFU)

方法

質控結果

其它特征

豬肺炎支原體

/

10-100

定量

生長良好

10-9稀釋度管變黃


豬肺炎支原體疫苗培養基培養豬肺炎支原體11天時的試驗結果

圖1 豬肺炎支原體疫苗培養基培養豬肺炎支原體11天時的試驗結果


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注:本文屬海博生物原創,未經允許不得轉載。

 

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