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雙歧桿菌的活化及保存

王娟
錄入時間:2023-10-12 16:03:43 來源:青島海博生物

一、雙歧桿菌簡介

 雙歧桿菌屬(Bifidobacterium)是嚴格厭氧的革蘭氏陽性桿菌,一端通常呈現分叉狀,是人和動物腸道中益生菌之一,可以分解多種碳水化合物產生乳酸,也屬于乳酸菌。

雙歧桿菌生長需要嚴格的厭氧環境,氧氣會對雙歧桿菌產生毒害作用,導致雙歧桿菌死亡,但在二氧化碳存在的條件下,對于低濃度的氧氣具有一定的耐受性,通常使用BBL培養基/TPY培養基/MRS培養基進行培養,培養基中常添加半胱氨酸做為還原劑幫助維持厭氧環境。

二、活化方法

培養基的選擇:MRS肉湯/瓊脂、TPY肉湯/瓊脂、BBL肉湯/瓊脂培養基均可。

培養環境:可使用厭氧培養箱、厭氧罐等設備。

操作方法:若菌種為凍干粉形式,按照說明書溶解后,可直接涂布或劃線至MRS/TPY/BBL平板上,也可加入至液體培養基中;若菌種為甘油凍存管形式,從冰箱中取出速融后,涂布或劃線至MRS/TPY/BBL平板上,也可加入至液體培養基中。

注:由于氧氣對雙歧桿菌具有毒害作用,因此進行雙歧桿菌的操作時,應在厭氧操作箱中進行。若在正?諝庵胁僮,應盡可能快的完成操作,從接種開始到平板放入厭氧環境中培養整個流程的時間,應盡可能控制在15min以內,長時間暴露在空氣中易導致雙歧桿菌死亡。

三、實驗室常用保存方法

雙歧桿菌的保存可使用甘油/脫脂牛奶菌種保存管低溫冷凍保存。挑取非選擇性培養基上培養好的雙歧桿菌至脫脂牛奶/液體菌種保存管中制成約108-109CFU/mL的菌液,置于超低溫冰箱或液氮罐中冷凍保存,在-70℃以下可保存兩年以上。


注:本文屬海博生物原創,未經允許不得轉載。


 

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