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懸浮和運輸培養基的出廠檢驗及驗收方法

紀旭艷
錄入時間:2023-10-11 15:55:10 來源:青島海博生物

一、懸浮和運輸培養基的介紹

  在進行微生物檢驗工作時,經常會用到一些樣品制備或者樣品運輸的培養基,其目的是保證微生物的活性,要求微生物存活并且不能過分增殖,處于相對穩定的一個狀態。用于樣品制備和菌液稀釋的磷酸鹽緩沖液、0.1%蛋白胨水等都屬于懸浮培養基,而用于采樣運輸的Cary-Blair氏運送培養基、Amies運送培養基等都屬于運輸培養基。


二、培養基的出廠檢驗

  待測培養基制備:按照說明書進行配制,分裝至試管,每管10mL(有特殊要求也可選用5mL)。

  1.接種及計數

  菌懸液制備:將質控菌株接種至非選擇性肉湯或平板中進行活化培養,使用生理鹽水或磷酸鹽緩沖液進行十倍系列稀釋至適宜梯度。

  在裝有待測培養基的試管中接種100 CFU~1000 CFU的目標菌,同時接種兩個平行管,混勻后,立即吸取1mL待測培養基混合液,使用非選擇性固體培養基傾注,每管接種1個平板;將剩余已接種菌液的待測培養基置20℃~25℃放置45min后;再吸取1 mL傾注平板,使用非選擇性固體培養基傾注,將平板置相應溫度下進行培養。

  培養結束后,計數靜置前后平板上的菌落數。

  2.結果判定

  靜置前后菌落數變化應在±50%。

  靜置變化率=(靜置后平板菌落數-靜置前平板菌落數)/靜置前平板菌落數×100%


三、培養基的驗收方法

  菌懸液制備:將目標菌接種至非選擇性肉湯中過夜培養。

  接種:用1μL接種環取一環工作菌懸液直接接種到裝有待測培養基的試管中,混勻后,立即用10μL接種環取一環工作菌培養物劃平行線接種平板,按標準方法中規定的培養時間和溫度培養;剩余已接種菌液的待測培養基置20℃~25℃放置45min后,再用10μL接種環取一環工作菌培養物劃平行線接種平板,按標準方法中規定的培養時間和溫度培養。

  結果判定:靜置前后接種平板上的目標菌應生長良好。


注:本文屬海博生物原創,未經允許不得轉載。

 

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