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細菌檢測最基礎的三區劃線操作要點



錄入時間:2023-8-3 15:39:52 來源:中科基因資訊公眾號

  “三區劃線法”是實驗室最常用的平板劃線接種方法,通過在平板上劃線,將細菌在瓊脂平板表面充分地分散開,使單個細菌能固定在一點上繁殖,形成單個菌落,以達到分離純化地目的,常常分三個區域進行劃線,故稱為“三區劃線法”。

  “三區劃線法”的操作:第一區起始位置可反復劃線,然后之字形劃線,劃線區域不超過平板1/3;第二區,平板旋轉60度,之字形劃線,最初的幾條線與第一區的右側末端交叉且之字劃線,之后連續劃線不再與一區接觸;第三區,平板再旋轉60度,進行三區劃線,規則與第二區劃線相同。各區首尾相接,菌量逐步減少,達到形成單個菌落的目的。

為什么劃不出單菌落?常見原因如下:

  1.沒有充分利于好劃線區域;

  2.各區域線過于密集,線與線之間重疊;

  3.與前一區交叉過多;

  4.劃線時接種環接觸點變動,未始終保持接種環的一點接觸瓊脂表面;

  5.未掌握好劃線力度與角度,劃破瓊脂;

  6.待接種的細菌菌量過多時,可在第一區劃線完成后進行灼燒,再進行第二、三區的劃線。


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