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微生物限度培養基適用性常見問題解決



錄入時間:2023-6-5 10:16:33 來源:微信公眾號微生物菌種網

1、在微生物實驗室進行平板類培養基適用性的時候,可能會遇到以下常見的情況,造成試驗失敗。

  1)培養基平皿表面水珠凝聚,造成涂布培養后菌落蔓延無法計數。

  2)培養后計數結果超標。

  3)培養后沒有逐日觀察,造成菌落生長成團,無法計數或計數結果統計錯誤。


2、原因分析及解決措施

情況①:培養基平皿表面水珠凝聚的原因在于澆碟的時候,培養基溫度高,在平皿表面會形成水珠。

  解決措施:培養基平皿表面水珠凝聚

  ◆培養基制備

  培養基制備的一般流程:

  ①上午10點開始用干粉培養基天平稱重,11點20開始滅菌,13:00開鍋,在滅菌鍋中冷卻至13:30。

  ②將對照培養基置于50℃水浴鍋中待用。

  知識點:滅菌鍋滅菌結束時,需要及時開鍋,避免培養基長時間在滅菌鍋中缺氧,造成培養基品質下降,培養基適用性失敗且影響實驗結果。

  ◆培養基澆碟

  50℃水浴鍋取出后,一般5分鐘之內將培養基澆置空平皿中。平皿冷卻后,觀察培養基表面有無水珠,若無水珠則可直接進行涂布操作。多余的培養基可以放置在生物安全柜中或置密封袋(不是呼吸袋)里2-8℃保存。

  若有水珠,若需要當天使用則打開平皿蓋,輕輕甩掉表面的水珠,在運行的生物安全柜中放置0.5-1h直到表面沒有水珠,然后進行涂布計數。

  若不需要當天使用:

  直接放置在生物安全柜中,蓋上平皿,生物安全柜關機,7天內使用。

  裝入自封袋中保存在2-8℃冰箱中,2周內使用。使用前,提前一天取出,使平皿中水珠自動蒸發消失。

情況②:培養后計數結果超標的原因在于菌懸液制備不均勻。

  每次制備的時候要渦旋3000轉30s,使用前再渦旋3000轉10s。特別是黑曲霉和白色念珠菌這種容易在底部沉底的菌,尤其需要注意。

情況③:培養后沒有逐日觀察,造成菌落生長成團。

  無法計數或計數結果統計錯誤,可以參考下圖解決這個問題。


文章來源:微信公眾號微生物菌種網

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