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GB4789.38《食品微生物學檢驗 大腸埃希氏菌計數》(征求意見稿)與2012版標準比對

許英俊
錄入時間:2023-4-23 15:02:34 來源:青島海博生物

一、標準簡介

  GB 4789.38 《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 大腸埃希氏菌計數》,通過樣品中大腸桿菌的計數多少,作為糞便污染指標來評價食品的衛生狀況,推斷食品中腸道致病菌污染的可能性。

  2023年2月10日,食品安全國家標準審評委員會秘書處就《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 大腸埃希氏菌計數》等38項食品安全國家標準和修改單(征求意見稿)征集意見,截止日期為2023年3月20日,F將GB 4789.38(征求意見稿)與GB 4789.38-2012進行比對探討。


二、變化要點

  《GB4789.38 食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 大腸埃希氏菌計數》中,有關大腸埃希氏菌的計數共涉及兩種方法:MPN法和平板法,這在兩個版本中是一致的。但每種方法的檢驗程序和操作步驟都有變化,相應的培養基、設備、相關試劑和附錄也都有所更改。詳細如下:

  1、MPN法檢驗程序

圖1 大腸埃希氏菌MPN計數法檢驗程序(左:2012版  右:征求意見版)

圖1 大腸埃希氏菌MPN計數法檢驗程序(左:2012版  右:征求意見版)

  MPN法總共分三個步驟,初發酵、復發酵和分離鑒定。從圖1對比可以看出,有關分離鑒定這一步,現行標準中是采用先在EMB平板上進行劃線培養,根據菌落特征挑取可疑菌落進行純化,進一步生化試驗進行鑒定,判斷結果;在征求意見稿中則直接采用劃線TBX平板進行培養的方法。

  有關大腸埃希氏菌在所涉及的兩種培養基(EMB和TBX)上的生長狀態和分離效果如圖2所示:

EMB和TBX培養基上大腸埃希氏菌的菌落特征和分離效果

圖2  EMB和TBX培養基上大腸埃希氏菌的菌落特征和分離效果


2、平板計數法

  現行標準中,是“將10 mL~15 mL冷至45℃±0.5℃的結晶紫中性紅膽鹽瓊脂(VRBA)傾注于每個平皿中。小心旋轉平皿,將培養基與樣品勻液充分混勻。待瓊脂凝固后,再加3 mL~4 mL VRBA-MUG覆蓋平板表層。凝固后翻轉平板,36℃±1℃培養18 h~24 h。選擇菌落數在10 CFU~100 CFU之間的平板,暗室中360 nm~366 nm 波長紫外燈照射下,計數平板上發淺藍色熒光的菌落!逼渲兄饕玫搅薞RBA、VRBA-MUG培養基,同時需要紫外燈照射相配合的形式,進行菌落計數。

  而在征求意見稿中,則只使用TBX傾注培養的方式即可根據菌落特征進行計數(如圖3)。

大腸埃希氏菌平板計數法檢驗程序(左:2012版   右:征求意見稿)

圖3  大腸埃希氏菌平板計數法檢驗程序(左:2012版   右:征求意見稿)

  有關大腸埃希氏菌及混合菌在所涉及的兩種培養基(VRBA-MUG和TBX)上傾注培養后的生長狀態如圖4所示:

圖4-1  大腸埃希氏菌的生長特征和混合菌分離效果

圖4-1  大腸埃希氏菌的生長特征和混合菌分離效果


圖4-2  VRBA-MUG上的混合菌在自然光和紫外光下的狀態


三、討論

  兩個版本相比,修改意見稿中通過對TBX的引入,使兩種方法的檢驗程序都簡化了很多。從檢驗效果來看,也能達到計數的目的,甚至優于之前的方法。這種改變是基于目前市場已經擁有質量過關、使用效果較好的TBX培養基為基礎的。實驗室人員在購買TBX培養基時,一定要選擇質量可靠的廠家,避免對檢驗結果造成影響。

  我公司生產的TBX試驗效果如圖5所示:   

圖5  TBX培養基上大腸埃希氏菌和其它腸桿菌科細菌的特征

圖5  TBX培養基上大腸埃希氏菌和其它腸桿菌科細菌的特征


相關產品:

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相關標準:

GB 4789.38-2012 大腸埃希氏菌計數 -點擊下載


注:本文屬海博生物原創,未經允許不得轉載。

 

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