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霉菌和酵母菌計數檢驗方法-化妝品安全技術規范(2022年版)



錄入時間:2022-11-30 10:32:51 來源:2022年版化妝品安全技術規范

1.范圍

  本規范規定了化妝品中霉菌和酵母菌數的檢驗方法。

  本規范適用于化妝品中霉菌和酵母菌數的測定。


2.定義

  2.1 霉菌和酵母菌數測定Molds and yeasts count

  化妝品檢樣經過處理,在一定條件下培養后,1g (1mL)檢樣中形成的霉菌和酵母菌總數,藉以判明化妝品被霉菌和酵母菌污染程度及其一般衛生狀況。

  本方法根據霉菌和酵母菌特有的形態和培養特性,在虎紅培養基上,置28℃±2℃培養5d,計算所生長的霉菌和酵母菌數。


3.儀器和設備

  3.1 恒溫培養箱:28℃±2℃。

  3.2 振蕩器。

  3.3 三角瓶:250mL。

  3.4 試管:18mm×150mm。

  3.5 滅菌平皿:直徑90mm。

  3.6 滅菌刻度吸管:10mL、1mL。

  3.7 量筒:200mL。

  3.8 酒精燈。

  3.9 高壓滅菌器。

  3.10 恒溫水浴箱。


4培養基和試劑

  4.1 生理鹽水

  見總則中3.1。

  4.2 虎紅(孟加拉紅)培養基

  成分:
蛋白胨
5g

葡萄糖
10g

磷酸二氫鉀
1g

硫酸鎂(無水)
0.5g

瓊脂
20g

1/3000虎紅溶液(四氯四碘熒光素)
100mL

蒸餾水加至
1000mL

氯霉素
100mg
  制法:將上述各成分(除虎紅外)加入蒸餾水中溶解后,再加入虎紅溶液。分裝后,121℃高壓滅菌20min,另用少量乙醇溶解氯霉素,溶解過濾后加入培養基中,若無氯霉素,使用時每1000mL加鏈霉素30mg。


5操作步驟

  5.1 樣品稀釋

  見菌落總數測定中5.1。

  5.2 取1:10、1:100、1:1000的檢液各2mL,分別注入2個滅菌平皿內,每皿1mL,注入融化并冷卻至45℃±1℃左右的虎紅培養基,充分搖勻。凝固后,翻轉平板,置28℃±2℃培養5d,觀察并記錄。另取一個不加檢液的滅菌空平皿,加入約15mL虎紅培養基,待瓊脂凝固后,翻轉平皿,置28℃±2℃培養箱內培養5d,為空白對照。

  5.3 計算方法:先點計每個平板上生長的霉菌和酵母菌菌落數,求出每個稀釋度的平均菌落數。判定結果時,應選取菌落數在5CFU~50CFU范圍之內的平皿計數,乘以稀釋倍數后,即為每g(或每mL)檢樣中所含的霉菌和酵母菌數。其他范圍內的菌落數報告應參照菌落總數的報告方法報告之。

  5.4 每g(或每mL)化妝品含霉菌和酵母菌數以CFU/g (mL)表示。

 

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