<font id="jjl7t"></font>
<video id="jjl7t"><dl id="jjl7t"><i id="jjl7t"></i></dl></video>
<dl id="jjl7t"><i id="jjl7t"></i></dl>
<video id="jjl7t"></video><dl id="jjl7t"></dl><video id="jjl7t"><i id="jjl7t"></i></video>
<dl id="jjl7t"></dl><dl id="jjl7t"><i id="jjl7t"><delect id="jjl7t"></delect></i></dl><dl id="jjl7t"></dl><dl id="jjl7t"></dl><noframes id="jjl7t">
<video id="jjl7t"></video>
<video id="jjl7t"><delect id="jjl7t"><delect id="jjl7t"></delect></delect></video><video id="jjl7t"><i id="jjl7t"></i></video>
<video id="jjl7t"></video><i id="jjl7t"></i>
<video id="jjl7t"></video>
<video id="jjl7t"></video>
中文版  |   English  |   加入收藏  |   客服熱線:400-0532-596
微生物技術資料
文章檢索
  首頁 > 微生物知識->海博原創文章——標準解讀->飲用天然礦泉水:大腸菌群檢驗方法及結果分析

飲用天然礦泉水:大腸菌群檢驗方法及結果分析

張輝
錄入時間:2021-7-26 13:44:50 來源:青島海博生物

一、大腸菌群簡介

 大腸菌群是革蘭氏陰性、無芽孢、氧化酶陰性的桿狀細菌,為需氧和兼性厭氧,可在有膽鹽(或具有其他抑制生長的表面活性劑)存在的情況下生長,通?稍36℃士2℃發酵乳糖并產酸和醛。主要由腸桿菌科中四個屬內的一些細菌所組成,即埃希氏菌屬、檸檬酸桿菌屬、克雷伯氏菌屬以及腸桿菌屬。

 大腸菌群主要來源于人畜糞便,故以此作為糞便污染指標來評價食品的衛生質量,推斷食品中有否污染腸道致病菌的可能。如果大腸菌群存在于食品中,表明未作有效的消毒處理、加工后保存條件不良或消毒后又受到污染?焖贆z驗這些細菌,有助于食品的衛生管理,維護消費者的食用安全。

二、參考標準

 《GB8538-2016 飲用天然礦泉水:大腸菌群檢驗》

三、檢驗原理

 3.1 多管發酵法

 根據大腸菌群細菌具有的生物特性,如革蘭氏陰性無芽孢桿菌,在37℃培養24h能發酵乳糖并產氣的特點,將不同量的水樣接種到含乳糖的培養基中,經培養后根據陽性反應結果可測出原水樣中大腸菌群的最可能數(MPN)。

 3.2 濾膜法

 采用孔徑為0.45μm水相微孔薄膜,將水中所含的細菌截留在濾膜上,然后將濾膜貼在選擇性鑒別培養基上,經37℃培養24h后,大腸菌群細菌在濾膜上長出具有特征性的菌落,直接計數典型菌落數,計算出每100mL水樣中所含的大腸菌群數。

 大腸菌群可產生β-半乳糖苷酶,分解培養基中的酶底物-茜素-β-D-半乳糖苷(以下簡稱Aliz-gal),使茜素游離并與固體培養基中的鋁、鉀、鐵、銨離子結合形成紫色(或紅色)的鰲合物,使菌落呈現相應的顏色。

四、檢驗方法以及結果分析

 4.1 多管發酵法

 大腸菌群多管發酵法檢驗程序見圖1。

圖1 大腸菌群檢驗程序


 4.1.1 礦泉水水源水檢測

 4.1.1.1 推測性檢驗

 a) 吸取10mL水樣接種到盛有10mL雙料乳糖膽鹽發酵培養液的試管中,共接種5份;

 b) 吸取1mL水樣接種到盛有10mL單料乳糖膽鹽發酵培養液的試管中,共接種5份;

 c) 吸取1mL水樣接種到9mL滅菌生理鹽水的試管中,混勻,用5mL滅菌吸管吸取5mL稀釋液,分別加到5支盛有10mL單料乳糖膽鹽發酵培養液的試管中,每管1mL(即0.1mL水樣);

 d) 輕搖試管,使液體充分混合,置36℃±1℃培養箱內培養25h。觀察每管是否產氣,若有氣體產生該管則為推測性檢驗陽性,如不產氣則為大腸菌群陰性。

 質控菌株接種到乳糖膽鹽發酵培養基管中,培養結果如下圖所示:

圖2 標準菌株在乳糖膽鹽發酵培養基中生長情況

 4.1.1.2 確證性試驗

 a) 自推測性檢驗陽性管中取一接種環培養液,接種到亮綠乳糖膽鹽培養液(BGLB)管中,置36℃±1℃培養箱中培養48h;

 b) 觀察BGLB管中的產氣情況,如有氣體產生,就可確定為“大腸菌群陽性”;如無氣體產生則為“大腸菌群陰性”。記下BGLB管里產氣的陽性試管數,查MPN表可得出水樣中大腸菌群的MPN值。

 質控菌株接種到BGLB管中,培養結果如下圖所示:

圖3 大腸菌群在BGLB肉湯中生長情況

 4.1.1.3 MPN值的計算

 如水樣含菌量少,也可按100mL、10mL、1mL接種,那么其實際MPN值應為表中的MPN值除以10;反之如含菌量較多,也可接種1mL、0.1mL、0.01mL,其實際MPN值應為表中的MPN值乘以10,余此類推。

 4.1.1.4 列舉說明

 假設推測性檢驗15支試管中的陽性管數如下:①在接種量為10mL的管中有5支管陽性;②在接種量為1mL的管中有4支管陽性;③在接種量為0.1mL的管中有2支管陽性;

 作為推測性檢驗結果為5-4-2。當把以上陽性管轉種到BGLB管里,經培養后,作為證實性檢驗所給的結果如為5-3-1,那么查MPN表,就可知大腸菌群的MPN值為每100mL水樣中110。接種量為100mL、10mL、1mL時,MPN值為11。如接種量為1mL、0.1mL、0.01mL時,MPN值即為1100。

表1 大腸菌群(MPN)檢索表(部分)

(總接種量55.5mL,其中5份10mL水樣、5份1mL水樣、5份0.1mL水樣)

 4.1.2 直接飲用的礦泉水的檢測

 礦泉水出廠成品水或準備直接飲用的礦泉水,一般不應有污染,需要經常檢驗,可按下法進行接種。

 4.1.2.1 推測性檢驗

 a) 用10mL的滅菌吸管向5支盛有10mL雙料乳糖膽鹽發酵培養液的試管中,每管接種10mL水樣。

 b) 置36℃±1℃培養箱中培養24h,觀察每支管的產氣情況,如有氣體產生,則認為推測性檢驗陽性。

 4.1.2.2 確證性試驗

 操作步驟同礦泉水水源水檢驗。

 4.1.2.3 MPN值的計算

 當經過證實性檢驗后,5管10mL水樣結果中,陽性反應的管數對應的MPN 值及其95%的可信限范圍見表2。

表2 用5管10mL水樣時各種陽性和陰性結果組合的MPN值及其95%的可信限

陽性反應管數

MPN/100mL

95%可信限

下限

上限

0

0

0

6.0

1

2.2

0.1

12.6

2

5.1

0.5

19.2

3

9.2

1.6

29.4

4

16

3.3

56.9

5

>16

8.0

無限


 4.2 濾膜法

 4.2.1 操作步驟

 4.2.1.1 用滅菌鑷子夾取滅菌濾膜邊緣部分,將粗糙面向上,貼放在已滅菌的濾床上,固定好濾器,將100mL水樣(如水樣含菌數較多,可減少過濾水樣量,或將水樣稀釋)注入濾器中,打開濾器閥門,在-5.07×104 Pa(負0.5大氣壓)下抽濾。

 4.2.1.2 水樣濾完后,再抽氣約5s,關上濾器閥門,取下濾器,用滅菌鑷子夾取濾膜邊緣部分,移放在品紅亞硫酸鈉培養基上,濾膜截留細菌面向上,濾膜應與培養基完全貼緊,兩者間不得留有氣泡,然后將平皿倒置,放入36℃±1℃恒溫箱內培養24h±2h。

 4.2.1.3 觀察濾膜上面的菌落特征。大腸菌群典型菌落在遠藤培養基上具有以下特征:

 a) 紫紅色,具有金屬光澤的菌落;

 b) 深紅色,不帶或略帶金屬光澤的菌落;

 c) 淡紅色,中心色較深的菌落;

 d) 挑取不少于3個(不足3個則全挑)可疑菌落,進行革蘭氏染色鏡檢觀察。

 質控菌株接種到品紅亞硫酸鈉培養基平板上,培養結果如下圖所示:


圖4 大腸菌群在品紅亞硫酸鈉培養基平板上生長情況

注:A:大腸埃希氏菌ATCC 25922;B:大腸埃希氏菌ATCC 8739;C:弗氏檸檬酸桿菌ATCC 43864

 4.2.1.4 凡系革蘭氏陰性無芽孢桿菌,再接種乳糖蛋白胨培養液,經36℃±1℃培養24h±2h后,如產酸產氣則判定為大腸菌群陽性。

圖5 大腸埃希氏菌ATCC 25922革蘭氏染色鏡檢結果


圖6 質控菌株在乳糖蛋白胨培養液中生長情況

 4.2.2 結果與報告

 濾膜上的大腸菌群菌落數按下列公式計算,以每100mL水樣中的大腸菌群數報告結果:

 每100mL水樣中大腸菌群菌落數(CFU/100mL)=確證為大腸菌群菌落數(CFU)×100/過濾的試樣量(mL)

 舉例說明:

 濾膜上有100個典型菌落,挑取10個典型菌落(可疑菌落)做革蘭氏染色鏡檢,發現有8個菌落為革蘭氏陰性無芽孢桿菌,這8個菌落接種乳糖蛋白胨培養液,培養后,有6支管產酸產氣,為大腸菌群陽性。

 則每100mL水樣中大腸菌群菌落數為:(100×6/10×100)/100=60(CFU/100mL)



 相關產品:

 http雙料乳糖膽鹽發酵培養基-點擊查看產品詳情


 單料乳糖膽鹽發酵培養基管(含小倒管)-點擊查看產品詳情


 煌綠乳糖膽鹽肉湯(BGLB)-點擊查看產品詳情


 品紅亞硫酸鈉瓊脂平板(9cm)-點擊查看產品詳情


 乳糖蛋白胨培養液-點擊查看產品詳情

 注:本文屬海博生物原創,未經允許不得轉載。

 

上一篇:大腸菌群的快速檢測方法及結果判斷

下一篇:大腸埃希氏菌O157:H7/NM檢驗解析(常規培養法)

相關文章:
飲用天然礦泉水中銅綠假單胞菌檢驗方法的改進 飲用天然礦泉水中產氣莢膜梭菌檢驗方法的改進
生活飲用水中大腸埃希氏菌檢驗方法及結果分析 生活飲用水中耐熱大腸菌群檢驗方法及結果分析
GB8538-2016飲用天然礦泉水:銅綠假單胞菌檢驗方法及結果分析 飲用天然礦泉水:糞鏈球菌檢驗方法及結果分析
生活飲用水中微生物的檢測方法 12種非飲用水水質檢測標準匯總。òㄥ仩t、工業、實驗用水等)
生活飲用水標準檢驗方法(微生物指標)所需培養基 用R2A培養基提高飲用水中細菌總數檢出率
首頁 | 關于我們 | 網上商城 | 在線客服 | 聯系我們
地址:青島市城陽區錦匯路1號A2棟
電話:400-0532-596 0532-66087773
   66087762、81935169
傳真:0532-81935080
郵箱:qdhbywg@vip.126.com
廣東辦事處
羅經理、溫小姐
電話:020-87204426 13711177972
郵箱:LWN7972@126.com
產品技術咨詢
工作日(周一至周六8:00-18:00):
18562658263 13176865511
其它時段:13105190021
投訴與建議
13105190021 13006536294
色国产精品一区在线观看|97超碰中文字幕|8090成人午夜|国产女人与公拘交
<font id="jjl7t"></font>
<video id="jjl7t"><dl id="jjl7t"><i id="jjl7t"></i></dl></video>
<dl id="jjl7t"><i id="jjl7t"></i></dl>
<video id="jjl7t"></video><dl id="jjl7t"></dl><video id="jjl7t"><i id="jjl7t"></i></video>
<dl id="jjl7t"></dl><dl id="jjl7t"><i id="jjl7t"><delect id="jjl7t"></delect></i></dl><dl id="jjl7t"></dl><dl id="jjl7t"></dl><noframes id="jjl7t">
<video id="jjl7t"></video>
<video id="jjl7t"><delect id="jjl7t"><delect id="jjl7t"></delect></delect></video><video id="jjl7t"><i id="jjl7t"></i></video>
<video id="jjl7t"></video><i id="jjl7t"></i>
<video id="jjl7t"></video>
<video id="jjl7t"></video>